一、肠缺血-再灌流大鼠远隔脏器受损与中性粒细胞粘附扣留的关系（论文文献综述）
余黎媛[1]（2021）在《右美托咪定对脓毒症患者外周血HMGB1、D-Lac、I-FABP表达的研究》文中指出[目的]通过监测右美托咪定（Dexmedetomidine,Dex）对脓毒症患者高迁移率族蛋白B1（High mobility group protein B1,HMGB1）表达水平的影响,探讨Dex对脓毒症患者肠黏膜屏障功能的作用。[方法]选取2020年3月至2021年1月云南大学附属医院（云南省第二人民医院）重症医学科收治的脓毒症患者合计60例为本研究对象,所有入组患者均符合Sepsis 3.0中相关诊断新标准[1],运用随机数字表法将其分成实验组（30例）和对照组（30例）。两组入院后按《2016年脓毒症与脓毒性休克处理国际指南》[2]强推荐意见予规范及个体化的综合对症支持治疗,并参照2018年《中国成人ICU镇痛和镇静治疗指南》[3]进行必要的适度镇静镇痛治疗。实验组应用右美托咪定稀释后0.2～0.7 μg/（kg·h）个体化静脉微量泵注,对照组则选用该指南推荐的ICU镇静基本用药咪达唑仑0.03～0.2mg/（kg·h）静脉微泵注;两组同时辅以舒芬太尼镇痛治疗,维持两组患者Richmond躁动-镇静评分（Richmond Agitation-Sedation Scale,RASS）在-2～0 分,重症监护室疼痛观察工具法（Critical care Pain Observation Tool,CPOT）评分在 0～1 分。比较两组患者:（1）一般临床特征:年龄、性别、原发疾病、入室急性生理与慢性健康评分（Acute physiology and chronic health evaluation,APACHE Ⅱ）、序贯器官衰竭评分（Sequential organ failure assessment,SOFA）;（2）炎症指标及肠屏障生物学指标:记录入ICU时（T0）、24h（T1）、48h（T2）、72h（T3）各时间点外周血中PCT表达水平,采用酶联免疫吸附剂（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）测定两组患者上述各时间点外周血中HMGB1、D-Lac和I-FABP水平;（3）分析炎症因子与肠屏障生物学指标的相关性;（4）评估临床预后:分别记录两组患者住ICU天数,电话随访其28天生存情况。运用SPSS 22.0软件对数据进行分析。计数资料比较采用χ2检验,整体差异对比应用重复测量方差分析,组内各时间点总体差异使用LsD-t检验进行两两比较,组间的比对运用两独立样本的t检验法;符合正态分布数据运用Pearson法作相关性分析;P<0.05为差异有统计学意义。[结果]（1）一般临床特征:两组患者在年龄、性别构成、原发感染疾病分布及入ICU时APACHEII评分、SOFA评分上差异无统计学意义（P>0.05）;（2）炎症因子结果显示:两组患者PCT及HMGB1水平在入室T0时无明显差异（P>0.05）,但经积极对症支持基础治疗后两组患者PCT、HMGB1水平均随时间的推移发生不同程度的下降趋势,差异显着（P<0.01）,实验组PCT的表达在治疗后T2、T3两个时间点均显着低于同期对照组（P<0.01）,且实验组HMGB1水平在T1、T2、T3各时间点较同期对照组均明显降低（P<0.05）;（3）肠屏障生物学指标结果显示:两组I-FABP水平均随时间的推移出现了不同程度的下降趋势（P<0.05）;对照组D-Lac在治疗后T2才开始出现下降趋势（P<0.05）,实验组D-Lac在治疗后的各时间点较入室T0均下降明显（P<0.05）;两组患者D-Lac及I-FABP水平在入室T0时差异不明显（P>0.05）,但实验组D-Lac、I-FABP的表达水平在治疗后T1、T2、T3各时间点较同时间点对照组下降更为显着（P<0.05）;（4）两组患者外周血HMGB1、PCT与D-Lac、I-FABP均成正相关（P<0.01）;（5）住院情况及预后:与对照组相比,实验组患者在ICU住院天数缩短显着,差异具有统计学意义（P<0.05）,但两组28天死亡率差异不具有统计学意义（P>0.05）。[结论]（1）右美托咪定可以显着降低脓毒症患者外周血中肠道屏障损伤生物标记物的表达水平,降低肠道屏障通透性,其机制可能与右美托咪定降低机体HMGB1的表达,减轻炎症反应对肠道组织的损伤有关。（2）右美托咪定镇静治疗可以一定程度上缩短脓毒症患者住ICU的时间。
彭永会[2]（2021）在《IVIM-DWI对兔小肠缺血再灌注损伤的评价》文中指出目的:对兔小肠缺血再灌注损伤（intestinal ischemia-reperfusion injury,IRI）模型进行IVIM-DWI成像及病理检查,观察分析成像参数与病理积分的相关性,探讨IVIM-DWI成像技术评估小肠IRI的价值。方法:成年新西兰大耳白兔64只,随机分为实验组（n=60）和对照组（n=4）,实验组分为缺血1h、2h、3h三个亚组（每组n=20）,每个亚组再分别灌注1h、2h、3h、4h、5h（每再灌注时间点n=4）,实验组开腹用无创动脉夹夹闭肠系膜上动脉（super mesenteric artery,SMA）主干制作兔肠缺血再灌注损伤模型,对照组仅开腹和分离SMA主干。造模结束后于各再灌注时间点行常规MRI平扫和IVIM-DWI检查,测量各时间点肠壁厚度和IVIM-DWI参数值,取相应小肠组织行病理学检查。采用单因素方差分析比较各时间点肠壁厚度、IVIM-DWI参数值及肠壁病理积分;用Pearson相关分析来比较实验组各参数值与肠壁厚度和病理积分的相关关系。结果:（1）肠壁厚度及IVIM-DWI参数值:实验组与对照组比较肠壁厚度及各IVIM-DWI参数值均有极显着性意义（P<0.001）;实验组同一缺血时间点肠壁ADC值、D值、f值随着再灌注时间延长逐渐降低,D*值逐渐增高,肠壁逐渐增厚,差异有极显着性意义（P<0.001）,其中缺血1h再灌注4h和5h肠壁ADC值和D值轻度升高（相对于再灌注3h）,D（9）值轻度降低;同一再灌注时间点肠壁ADC值、D值和f值随着缺血时间延长逐渐降低,D（9）值逐渐升高,肠壁逐渐增厚,差异有极显着性意义（P<0.001）;缺血和再灌注损伤时长相等时,缺血时间越长肠壁ADC值、D值、f值稍低,D*值稍高,肠壁稍厚,差异有显着性意义（P<0.05）。（2）病理结果:对照组肠壁颜色红润,血运良好,肠壁各层结构显示清晰,各时间点病理积分无统计学意义（P>0.05）。实验组缺血1h再灌注1-5h肠壁呈暗红色,肠管蠕动减弱,损伤主要在黏膜层和黏膜下层,再灌注3h损伤最重,镜下见固有层毛细血管暴露、溃疡形成,再灌注4h、5h肠壁损伤程度稍减轻,黏膜上皮早期修复;缺血2h再灌注1-5h肠壁颜色普遍呈暗红色,肠管痉挛明显,肠管扩张积液进行性加重,损伤向隐窝层延伸,黏膜上皮早期修复;缺血3h再灌注1-5h肠壁呈深红色,并逐渐变为炭黑色,肠管持续性痉挛,损伤累及肌层,再灌注4h后肠壁发生不可逆损伤。实验组与对照组比较差异均有极显着性意义（P<0.001）。IVIM-DWI参数值与肠壁厚度及病理积分有较好的相关关系,其中D值与两者的相关性最高（r1=-0.890;r2=-0.907）。结论:（1）IVIM-DWI成像技术能够间接反映小肠IRI的病理改变,可作为一种无创评价小肠IRI的成像技术;（2）小肠缺血3h再灌注4h肠壁发生不可逆损伤,为兔小肠IRI模型肠壁存活上限;（3）IVIM-DWI参数中D值对诊断小肠IRI的价值较大,r D值≥32.82%时提示肠壁发生不可逆的再灌注损伤。
李承霞[3]（2021）在《远隔缺血适应治疗症状性颅内动脉粥样硬化性狭窄的临床研究》文中研究说明目的:在症状性颅内动脉粥样硬化性狭窄（s ICAS）人群中经连续12个月的远隔缺血适应（RIC）治疗,探讨RIC的临床有效性及安全可行性,评价RIC对s ICAS患者卒中复发率、临床预后及血清学指标的影响,探索RIC可能的脑保护机制,揭示其在防治脑卒中发生和复发中的重要临床应用价值,为随后的临床应用提供重要证据。方法:选择2018年12月-2019年12月在安徽省芜湖市第二人民医院神经内科病房进行住院后接受治疗的脑梗死患者,按照相关标准入组,并根据随机双盲原则分为干预组（RIC组）和对照组（Sham-RIC组）,分别给予标准化药物治疗+RIC治疗/Sham-RIC治疗1年,并进行随访1年。在临床终点事件发生时、第3月及12月治疗结束时,对患者进行门诊随访,观察这期间患者卒中复发率、临床预后及血清学指标变化情况。结果:（1）最后共80例患者完成治疗和随访,进入最终的数据分析,其中RIC组（干预组）40例,sham-RIC组（对照组）40例。（2）治疗3个月,RIC组脑梗死再发生率小于对照组（2.5%vs 23.5%,P=0.025）;治疗12个月后,RIC组脑梗死再发生率小于对照组（7.5%vs 25.0%,P=0.034）。（3）治疗前,两组基线NIHSS评分相比,差异无统计学意义（P>0.05）;入组3个月,RIC组NIHSS评分[（8.45±2.55）分]较入组前[（10.48±3.15）分]降低（P<0.001）;入组12个月后,RIC组NIHSS评分[（5.93±1.62）分]较入组前明显下降（P<0.001）,同期,较对照组[（8.18±1.55）分]相比也显着下降（P<0.001）。（4）治疗前,两组基线m RS评分相比,差异不明显（P>0.05）;入组3个月,RIC组m RS评分[（2.40±0.50）分]较入组前[（3.23±0.70）分]降低（P=0.011）;入组12个月后,RIC组m RS评分[（1.95±0.32）分]较入组前降低（P=0.001）,同期与对照组[（2.35±0.62）分]对比,RIC组m RS评分也呈明显下降趋势（P=0.001）。（5）治疗12月后,RIC组血红蛋白（HB）含量[（125.20±9.17）g/l]较对照组[（130.80±11.45）g/l]降低（P=0.018）,RIC组中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）水平（1.71±0.55）较对照组（2.46±0.39）降低（P<0.001）,RIC组平均血小板体积（MPV）水平[（10.57±0.99）f L]较对照组[（11.30±1.06）f L]降低（P=0.002）,RIC组血小板分布宽度（PDW）水平[（15.98±1.58）%]较对照组[（17.36±1.67）%]降低（P<0.001）,RIC组超敏C-反应蛋白（hs-CRP）水平[（4.17±0.75）mg/l]较对照组[（5.19±0.99）mg/l]下降（P<0.001）。（6）治疗前后变化对比,RIC组NLR、MPV、PDW、hs-CRP降低幅度均较对照组明显,具有统计学差异（均P<0.05）。结论:RIC是降低s ICAS患者卒中复发率、改善临床预后的一种安全有效的方法,其机制可能与抑制血小板活化、抵抗炎症反应相关;RIC可用于缺血性脑卒中患者的二级预防,具有较高的应用推广价值,但目前仍需要更多大样本临床试验及数据来验证。
邓婉君[4]（2020）在《参苓白术散治疗重症肺炎患者并发胃肠功能障碍的临床研究》文中研究说明目的:观察参苓白术散治疗重症肺炎患者并发胃肠功能障碍的临床疗效及安全性。方法:采用前瞻性随机对照试验设计,筛选2018年12月至2019年12月期间在成都中医药大学附属医院住院的重症肺炎并发胃肠功能障碍患者64例,按1:1的比例分为观察组和对照组,每组32例。对照组采用西医基础治疗,观察组采用参苓白术散联合西医基础治疗,疗程均为14天,观察两组患者治疗前后胃肠功能障碍评分、腹内压、肠鸣音次数、食欲视觉模拟评分、炎症指标、临床肺部感染评分及安全性指标的变化。结果:1、基线资料分析:两组患者治疗前的基线资料比较,均衡一致。2、临床疗效分析:治疗14天后,观察组有效率90.00%,对照组有效率67.74%,组间有效率对比,观察组的临床疗效明显优于对照组（p<0.05）。3、胃肠功能变化:两组患者治疗前后胃肠功能障碍评分、腹内压、肠鸣音次数、食欲视觉模拟评分等变化对比,均具有统计学意义（p<0.05）。4、CPIS评分变化:治疗后两组患者CPIS评分较治疗前均有所下降,观察组较对照组变化更为明显（p<0.05）。5、炎症指标变化:治疗后两组患者血清WBC、CRP、PCT均值较前明显下降,组间比较,差异无统计学意义（p>0.05）。6、亚组分析:治疗14天后,老年人群患者的胃肠功能障碍评分及食欲视觉模拟评分明显改善,肠鸣音次数明显增加,腹内压明显下降,观察组的疗效变化明显优于对照组。7、安全性分析:两组患者在治疗过程中均未出现严重不良反应,治疗前后各项安全性指标变化不明显。结论:1、参苓白术散可以缓解重症肺炎并发胃肠功能障碍患者的临床症状,改善胃肠功能,缩短胃肠功能恢复时间,降低病情严重程度;2、参苓白术散对老年人群的胃肠功能改善程度更为显着,表明中西医结合治疗对重症肺炎并发胃肠功能障碍的老年患者临床疗效更突出;3、参苓白术散治疗重症肺炎并发胃肠功能障碍安全性良好。
储诚南[5]（2020）在《创伤失血性休克时氨甲环酸保护肠粘膜屏障的机制研究》文中认为研究背景及目的:创伤引起的失血性休克是创伤患者死亡的主要原因。近年来,国内外学者对创伤失血性休克（Trauma/hemorrhagic shock,T/HS）病理生理过程及治疗策略进行了广泛深入的研究,提出了允许性低血压、损伤控制性复苏等治疗原则,极大的提高了救治成功率。在T/HS原发病因得到有效控制后,仍有半数以上患者死于后期并发症,其中肠粘膜屏障功能障碍是最为关键的环节。研究证明静脉注射氨甲环酸（TXA）能有效保护T/HS肠粘膜屏障,但是其具体机制目前尚不清楚。我们既往研究表明,在脓毒症及缺血再灌注损伤的病理生理过程中,中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）参与了肠屏障功能损伤。同时也有文献证实T/HS发生后有大量中性粒细胞向肠道趋化浸润。因此本研究拟探究NETs在T/HS肠屏障损伤过程中的病理生理作用,以及在T/HS中TXA、NETs与肠屏障损伤三者的关系和相关机制,为临床T/HS肠屏障损伤的治疗提供新的切入点及理论依据。方法:（1）建立大鼠T/HS模型,将实验动物分为4组:1)Sham组,2)T/HS组,3)DNase I组,4)TXA组。建模完成后,DNase I组静脉注射DNase I溶液降解生成的NETs,TXA组静脉注射TXA。24小时后取大鼠血液及末端回肠标本,ELISA法测定大鼠血清炎症因子水平,HE染色评估肠绒毛组织病理损伤情况,Western Blot及免疫荧光法检测肠道紧密连接蛋白表达情况,以探究NETs在T/HS肠屏障损伤过程中的病理生理作用及氨甲环酸保护肠屏障相关机制。（2）建立大鼠T/HS模型,将动物分为不同TXA给药时间组（TXA 1/3/6hr）和不同TXA给药剂量组（TXA 5/10/20 mg/kg）。建模完成后24小时取材进行相应检测,探究不同氨甲环酸给药时间及给药剂量对大鼠肠屏障影响。（3）利用健康志愿者外周中性粒细胞进行体外细胞实验,将分离的中性粒细胞与PMA或TXA进行孵育,检测NETs生成指数,ROS的生成指数,Western Blot检测相关通路蛋白表达情况,拟初步探究TXA影响NETs生成的相关通路。结果:（1）T/HS发生后中性粒细胞会向肠道聚集浸润并释放NETs,导致肠道紧密连接蛋白破坏;使用DNase I清除NETs后,肠道紧密连接蛋白表达明显增加并且肠道组织病理评分降低;静脉注射TXA后,同样观察到肠道NETs水平明显降低,紧密连接蛋白表达增加。（2）与T/HS组相比,早期静脉注射TXA（TXA 1hr组）能显着降低NETs的产生并且防止紧密连接蛋白的破坏,而延迟给药组（TXA6hr）与T/HS组比较,NETs生成水平及肠屏障损伤无明显差异。此外,TXA给药与抑制NETs生成、保护肠屏障之间呈剂量依赖性,高剂量（20 mg/kg）的TXA治疗显示出比治疗剂量（10 mg/kg）更好的效果。然而,血栓弹力图的结果表明,高剂量组的R值和K值较Sham组明显下降,表明大剂量TXA治疗可能会导致血液高凝状态及血栓形成风险增加。（3）体外细胞实验显示,TXA组NETs生成指数及ROS生成水平较PMA组明显降低,同时Western Blot示TXA组p-P38/P38及p-ERK/ERK相对表达水平较PMA组明显降低。结论:（1）NETs参与了T/HS肠屏障损伤的病理生理过程,使用TXA能有效抑制NETs生成达到保护肠屏障作用。（2）早期及高剂量氨甲环酸给药能更有效保护肠屏障;但高剂量给药会导致血液高凝状态,增加血栓形成风险。（3）TXA可能通过经典的ROS/MAPK通路调控NETs的生成。
张力尹[6]（2020）在《异丙酚预处理通过NLRP3/caspase-1信号通路减轻大鼠肠缺血再灌注损伤作用及机制》文中进行了进一步梳理目的:探讨异丙酚预处理是否能通过抑制NLRP3/caspase-1信号通路激活,进而减轻肠缺血再灌注损伤。方法:选取48只雄性成年SD大鼠随机分为三组:假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I/R组）和异丙酚组（P组）,每组16只,体重210-250g。使用无创动脉夹夹闭肠系膜上动脉90min,再灌注2h,建立肠I/R模型。P组在夹闭肠系膜上动脉前30 min,经腹腔注射异丙酚100mg/kg;Sham组和I/R组腹腔注射等体积脂肪乳（异丙酚的溶剂）。通过苏木素-伊红染色（hematoxylin and eosin,HE）观察小肠粘膜的形态学变化,并进行肠组织Chiu’s评分;采用蛋白质印迹法（Western Blot）检测NLRP3、caspase-1 p20、occludin、cleaved caspase-3、bax和bcl-2蛋白表达水平;通过免疫荧光（Immunofluorescence）染色观察肠道NLRP3、caspase-1 p20蛋白的表达情况;采用原位末端标记法（terminal dexynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL）检测肠道细胞凋亡情况;进一步通过酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测大鼠血清中炎症因子白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）和白细胞介素-18（interleukin-18,IL-18）的表达水平。实验数据均使用SPSS 21.0统计软件进行分析,多个样本均数间比较采用单因素方差分析,两两比较采用最小显着性差异检验（least significant difference,LSD）;采用Pearson相关系数分析NLRP3和caspase-1 p20蛋白与小肠Chiu’s评分的相关性。P<0.05表示差异有统计学意义。结果:1.HE染色结果显示,与Sham组比较,I/R组大鼠小肠粘膜损伤明显加重,Chiu’s评分明显升高,差异有统计学意义（P<0.01）;与I/R组比较,P组小肠粘膜损伤明显减轻,Chiu’s评分显着降低,差异有统计学意义（P<0.01）;Sham组与P组之间比较,差异有统计学意义（P<0.01）。2.Western Blot检测结果显示,与Sham组比较,I/R组的NLRP3、caspase-1 p20、cleaved caspase-3、bax的蛋白表达均明显上调,差异有统计学意义（P<0.01）,occludin、bcl-2的蛋白表达均明显下调,差异有统计学意义（P<0.01）。与I/R组比较,P组的NLRP3、caspase-1 p20、cleaved caspase-3、bax的蛋白表达均明显下调,差异有统计学意义（P<0.01）,occludin、bcl-2的蛋白表达均明显上调,差异有统计学意义（P<0.01）。与Sham组比较,P组的NLRP3的蛋白表达有所上调（P<0.01）,occludin和bcl-2的蛋白表达有所下调（P<0.01）,差异有统计学意义;caspase-1 p20、cleaved caspase-3、bax的蛋白表达无明显统计学差异（P>0.05）。3.免疫荧光染色结果显示,与Sham组比较,I/R组肠道NLRP3和caspase-1 p20的表达明显增强,平均荧光强度显着提高（P<0.01）;与I/R组比较,P组的NLRP3和caspase-1 p20的表达明显减弱,平均荧光强度显着下降（P<0.01）;与Sham组比较,P组NLRP3和caspase-1 p20的表达有所增强,平均荧光强度有所提高（P<0.01）。4.TUNEL染色结果显示,各组小肠粘膜细胞凋亡比率分别为:Sham组为（3.15±1.41）%,I/R组为（59.96±9.76）%,P组为（13.12±1.9）%。I/R组和P组小肠粘膜细胞凋亡比率均高于Sham组（P<0.01）,但P组小肠粘膜细胞凋亡比率显着低于I/R组（P<0.01）。5.ELISA检测结果显示,与Sham组比较,I/R组和P组血清中IL-1β和IL-18的水平明显升高（P<0.01）;与I/R组比较,P组血清中IL-1β和IL-18的水平明显下降（P<0.01）。6.Pearson相关性显示,NLRP3和caspase-1p20蛋白与小肠Chiu’s评分有显着正相关性（P<0.01）。结论:1.肠缺血再灌注可以导致肠道NLRP3/caspase-1信号通路激活。2.异丙酚预处理可能部分通过抑制NLRP3/caspase-1信号通路激活,发挥抗炎和抗凋亡作用,减轻肠缺血再灌注所致肠道损伤。
程文杰[7]（2020）在《右美托咪定和羟考酮对下肢缺血再灌注导致的局部及脑损伤的影响》文中认为临床多用到止血带以达到减少术中失血和保持手术野清晰,然而止血带所引起的缺血再灌注（I/R）损伤逐渐受到重视,该损伤不但使肢体原发缺血部位受损,还引起继发远隔器官的损伤。除了肢体缺血再灌注损伤外,止血带充气还可引起高血流动力状态。虽然止血带引起的I/R损伤和高动力反应已被认识多年且其复杂的病理生理机制和治疗措施尚未完全了解,但大量研究指出,骨骼肌损伤、氧自由基的脂质氧化作用和中性粒细胞介导的炎性反应,在肢体缺血再灌注诱发局部和远隔器官功能障碍中起重要作用。围手术期神经认知障碍（perioperative neurocognitive dysorders,PNDs）指术前无精神障碍的患者在术后出现了注意力不集中、记忆能力下降等认知功能的改变,该病在老年患者中较为常见。PNDs不仅延长患者住院时间,增加住院费用,而且增加患者术后病死率,引发了一系列医学、社会及经济问题,虽然对PNDs进行了很多方面的研究,但究其病因及发病机制至今尚不明确,而越来越多的研究提示机体炎性反应可能在其中发挥了巨大的作用。右美托咪定（Dex）是一种新型a2肾上腺素受体激动剂,具有镇静、抗焦虑、催眠、镇痛以及交感神经抑制作用,作为辅助用药,已被广泛应用于手术麻醉。大量研究证明右美托咪定可以对器官的缺血再灌注损伤起保护作用,目前对于该药机体保护作用的研究主要集中于脑、心、肝等重要脏器,有关其对止血带所引发的I/R损伤的影响报道较少且存在争议。羟考酮（Oxy）是一种半合成阿片类药物,主要作用于中枢神经系统μ和k阿片受体产生镇痛作用。最近的研究表明,羟考酮不仅具有强镇痛作用,而且具有减轻炎症反应的作用。目前,该药对止血带所引发的I/R的影响无文献报道。围术期医学是麻醉学发展的方向,既往麻醉医生只关注术中病人的安全是不足的,不利于麻醉学科的发展和麻醉医生作用的发挥。麻醉医生应优化麻醉方案,设法防治围术期并发症,改善患者的转归。综上本研究旨在观察右美托咪定和羟考酮对下肢缺血再灌注导致的局部及脑损伤的影响并探讨其相关机制。目的:首先观察比较右美托咪定与羟考酮对肢体缺血再灌注患者的保护效应;其次通过建立下肢止血带缺血再灌注动物模型,观察两药预处理对下肢缺血再灌注后局部肢体及脑损伤的影响,并探讨其相关机制。方法:首先选取择期行单侧下肢手术的患者随机分为对照组缺血-再灌注组（I/R）、右美托咪定组（Dex）、羟考酮组（Oxy）。比较各组止血带引起的血流动力学参数的变化。检测各组围术期血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、肿瘤坏死因子-a（TNF-a）、白介素-6（IL-6）、脂肪酸结合蛋白3（FABP3）、内皮素-1（ET-1）、脑源性神经营养因子（BDNF）变化。其次,利用C57BL6小鼠建立了止血带致急性后肢I/R损伤动物模型。实验将小鼠随机分为sham组、I/R组、Dex组、Oxy组,应用实时微循环成像系统评估各组小鼠肢体灌注情况,采用HE染色、Masson染色、电镜观察各组小鼠腓肠肌形态学变化。检测每组小鼠血清TNF-a水平、腓肠肌收缩力及ATP浓度,并采用western blot检测骨骼肌中TLR4、NF-k B、SIRT1和PGC-1a的表达。最后,应用Morris水迷宫（MWM）测试评估行为改变,免疫荧光法观察各组海马区NF-k B的表达情况,并采用western blot检测海马组织中TLR4、NF-k B、CD68、TNF-a、CD206、IL-10、NR2B。此外,用电生理海马脑片技术观察右美托咪定和羟考酮对幼鼠海马CA1区神经元s EPSC的影响。通过以上实验结果,我们观察了右美托咪定和羟考酮预处理是否能减轻止血带引起的局部骨骼肌损伤和远隔脑损伤,并探讨其相关机制。结果:1 右美托咪定与羟考酮对肢体缺血再灌注患者保护效应的对比研究止血带诱发收缩压（SAP）、平均动脉压（MAP）、舒张压（DAP）、心率-血压乘积（RPP）明显升高。与羟考酮相比,右美托咪定可明显降低心率（HR）。右美托咪定和羟考酮都可降低止血带引起的SAP升高,两者对DAP无明显影响。与术前基础值相比,术后患者血浆中TNF-a、MDA、IL-6、FABP3、ET-1的水平升高,而SOD、BDNF水平下降;右美托咪定和羟考酮可明显减小以上指标的手术前后的变化幅度,除BDNF指标外两者比较无明显差异。与右美托咪定相比,羟考酮可降低术后BDNF水平。2 右美托咪定和羟考酮对下肢缺血再灌注后局部肢体的保护效应2.1 右美托咪定和羟考酮对下肢缺血再灌注后肢体血流的影响止血带结扎后缺血侧肢体血流灌注显着减少,左右下肢平均血流的比值（L/R比值）明显下降。与对照组相比,缺血再灌注组小鼠止血带松开后结扎侧下肢血流稍增多,差异无统计学意义。与缺血再灌注组比较,右美托咪定和羟考酮预处理小鼠结扎侧肢体血流表现出增多的趋势,差异亦无统计学意义。2.2 右美托咪定和羟考酮减轻下肢缺血再灌注后炎症反应的机制与正常形态的腓肠肌组织相比,肢体缺血再灌注后腓肠肌表现出明显损伤;右美托咪定和羟考酮预处理可明显减轻腓肠肌缺血再灌注损伤的程度。此外,右美托咪定、羟考酮预处理可明显减少肢体缺血再灌注后小鼠腓肠肌中TLR4和NF-k B的蛋白表达,而两者间比较无明显差异。2.3 右美托咪定和羟考酮改善下肢缺血再灌注后骨骼肌线粒体功能与正常腓肠肌组织相比,肢体缺血再灌注后,小鼠腓肠肌单收缩、强直收缩力及ATP含量明显下降,右美托咪定、羟考酮预处理可提高缺血再灌注后小鼠腓肠肌单收缩、强直收缩力及ATP含量,差异有统计学意义;而两者间比较无明显差异。此外,右美托咪定、羟考酮预处理可明显增加肢体缺血再灌注后小鼠腓肠肌中SIRT1和PGC-1a的蛋白表达,而两者间比较无明显差异。3 右美托咪定和羟考酮对下肢缺血再灌注导致脑损伤的影响3.1 右美托咪定和羟考酮对下肢缺血再灌注小鼠学习记忆功能的影响与正常小鼠相比,肢体缺血再灌注后,小鼠学习记忆功能明显受损,右美托咪定预处理可减轻小鼠学习记忆受损情况,而羟考酮预处理对此则无影响。与正常小鼠相比,肢体缺血再灌注后,小鼠血清TNF-a含量明显升高,海马NF-k B阳性细胞表达明显增多,右美托咪定、羟考酮预处理可减少缺血再灌注后小鼠血清TNF-a含量及海马NF-k B阳性细胞表达,而两者间比较无明显差异。此外,右美托咪定、羟考酮预处理可明显减少肢体缺血再灌注后小鼠海马中TLR4、NF-k B、CD68和TNF-a的蛋白表达,而两者间比较无明显差异。各因素对小鼠海马CD206和IL-10含量无明显变化。3.2 右美托咪定和羟考酮对海马神经元s EPSC及下肢I/R后海马NR2B表达的影响与给药前基础值相比,予右美托咪定后海马CAl区神经元s EPSC发放频率和振幅均明显降低,以人工脑脊液冲洗后,其神经元s EPSC发放频率和振幅回复;而羟考酮对海马CAl区神经元s EPSC发放频率和振幅无明显影响。与正常小鼠相比,肢体缺血再灌注后,小鼠海马NR2B的表达明显增多;右美托咪定预处理可明显减少肢体缺血再灌注后小鼠海马NR2B的表达,而羟考酮对肢体缺血再灌注导致的小鼠海马NR2B表达增多无影响。结论:1本研究表明应用止血带行下肢手术的患者,术中伴有高血流动力反应和促炎细胞因子升高,甚至出现远隔多器官损伤。右美托咪定和羟考酮都可减轻止血带所致的高血流动力学状态,降低机体炎症反应从而对患者起保护效应。2止血带所致缺血再灌注可致小鼠骨骼肌损伤;右美托咪定或羟考酮预处理可抑制TLR4/NF-k B通路降低炎症反应,维持SIRT1/PGC-1a平衡改善线粒体功能进而减轻缺血再灌注致骨骼肌损伤;而两者对缺血再灌注肢体血流灌注无有效改善。3肢体缺血再灌注可导致全身炎症,海马谷氨酸受体（NR2B）表达增多产生兴奋性毒性,进而损伤小鼠学习记忆能力;右美托咪定组预处理可抑制小胶质细胞转化为促炎型小胶质细胞（M1）,通过TLR4/NF-k B通路减轻炎症反应,进而改善认知功能损伤,此外右美托咪定可能通过减少海马突触前膜兴奋性递质谷氨酸释放及抑制谷氨酸受体（NR2B）表达,从而对认知损害产生保护效应。羟考酮预处理亦可抑制小胶质细胞转化为促炎型小胶质细胞（M1）,通过TLR4/NF-k B通路减轻炎症反应,但对学习记忆改善不明显,究其原因可能与其对海马谷氨酸受体（NR2B）表达增多无影响有关。
陈亚惊[8]（2020）在《细胞焦亡在小鼠肠淤血再灌注损伤中的作用研究》文中研究指明背景:在相关临床疾病如肝移植、肠移植、肠梗阻等的治疗中,部分血流阻断,已明确可以造成肠淤血损伤（ICI,Ischemia Reperfusion Injury）;而当血流恢复再通后肠组织损伤并没有减轻,同时组织损伤产生的毒素、易位的菌群等随血流循环至远端器官以及全身,造成远隔组织器官的损伤,即肠淤血再灌注损伤（ICRI,Intestinal Congestion-reperfusion Injury）。相关研究表明凋亡在ICRI的发生机制中起重要作用。凋亡是一种经典的细胞死亡方式,而新近的研究表明以炎症性反应和细胞溶解破裂为特点的细胞焦亡同样是细胞的一种死亡方式。细胞焦亡的发生有两条途径,即半胱氨酸蛋白酶（caspase）家族中的caspase1/4/5/11介导的经典途径和脂多糖（LPS,Lipopolysaccharide）介导的非经典途径。在焦亡的经典途径中,当机体细胞受到内外各种有害刺激时,通过胞内的模式识别受体（pattern recognitions receptors,PRRs）识别病原体相关分子模式（pathogen associated molecular patterns,PAMPs）或损伤相关分子模式（danger associated molecular patterns,DAMPs）,与/或接头蛋白ASC结合形成一种多蛋白复合物的炎性小体,并募集和激活caspase-1前体,活化的caspase-1对反应底物GSDMD进行切割,形成的N端GSDMD能够将细胞膜打孔并引起细胞的溶解性死亡,释放大量的炎症细胞及趋化因子等,加重炎症反应,引起组织的进一步损伤;在非经典途径中,LPS通过激活caspase-4/5（人）和caspase-11（小鼠）对GSDMD进行切割进而发生下一步反应。细胞焦亡的这种死亡方式已被广泛研究,存在于多种组织损伤中,炎症性肠病中也证实有细胞焦亡的参与,但目前为止,在ICRI中并没有明确的报道表明细胞焦亡参与其发生发展中。根据以上所述,我们猜想细胞焦亡也参与到ICRI的发生机制中并起到一定的重要作用,因此我们通过建立ICRI的动物模型,验证上述猜想并探讨ICRI的发生机制。目的:本实验通过建立小鼠肠淤血再灌注损伤的动物模型,检测细胞焦亡相关基因的表达,探讨细胞焦亡是否是小鼠在ICRI的损伤机制。方法:雄性C57BL/6小鼠142只（周龄810周,体重1822 g,SPF级）被用于本实验研究。首先建立肠淤血损伤（ICI）模型,得出最佳的淤血长度和淤血时间后,进行下一步的肠淤血再灌注损伤（ICRI）模型的建立。具体如下所述。1.建立ICI模型。（1）进行生存分析观察:根据小鼠小肠的总长度,分别选取长度为10cm、15cm、20cm的肠管进行实验的分组,共4组,分别为假手术对照组（Control组,n=10）、淤血肠管10cm组（Congestion 10cm,C10组,n=10）、淤血肠管15cm组（Congestion 15cm,C15组,n=10）和淤血肠管20cm组（Congestion 10cm,C20组,n=10）,使用11-0带针丝线分别结扎C10组、C15组、C20组的肠管系膜缘侧静脉血管,对照组不结扎血管,随后观察48h,记录小鼠生存情况并绘制生存曲线（Kaplan-Meier法）,进行组间比较（Log-rank检验）;2)获取标本:另取60只小鼠使用以上方法分别结扎,C10组（n=15）、C15组（n=15）、C20（n=15）组的肠管系膜缘侧静脉血管,control组处理同1)（n=15）,分别留取淤血不同时间点（Control、0.5h,1h、1.5h、2h）的肠管标本各3份,进行常规HE染色后观察小肠组织的病理学改变,采用Chiu’s肠黏膜损伤评分方法对小肠黏膜的损伤进行评估,并通过Spearman相关性分析法分析不同组间和不同时间点损伤的相关性。最后得出小鼠肠淤血模型最佳的淤血长度和淤血时间的参数,用于后续实验。2.建立ICRI模型:以淤血肠管长度15cm、淤血时间1h,进行淤血再灌注损伤的（ICRI）研究。将雄性C57BL/6小鼠42只（周龄810周,体重1822 g,SPF级）,根据再灌注时间的不同进行分为7组,每组各6只,分别为:假手术对照组（Control组）,ICR 0.5h组（再灌注0.5h）、ICR 1h组（再灌注1h）、ICR 1.5h组（再灌注1.5h）、ICR 2h组（再灌注2h）、ICR 2.5h组（再灌注2.5h）、ICR 3h组（再灌注3h）。使用11-0带针丝线,结扎肠管长度15cm、淤血时间1h后去掉结扎线,观察并采集上述再灌注不同时间点的小鼠血液和肠组织标本;提取血液标本的血清,运用生化检测仪对肝脏功能和心肌酶的水平情况进行检测;HE染色观察各组小鼠小肠的组织病理学改变;使用RT-PCR法和Western Blot法分别检测各组肠组织中细胞焦亡和炎症相关的基因的表达情况。结果:（1）使用丝线结扎肠系膜静脉血管成功建立了小鼠ICI模型,得出最佳模型条件为淤血肠管长度15cm、淤血时间1h,在此基础上又成功建立了ICRI模型;（2）肝功能和心肌酶的检测结果提示,各实验组与假手术对照组相比表达量均随着再灌注时间的延长而升高,其中ALT（ICR 2h组,p<0.01）)、AST与LDH（ICR 1.5h组,p<0.01）、AST/ALT（ICR 2.5h,p<0.05）、CK（ICR 2.5h组,p<0.01）和CK-MB（ICR 1.5h组,p<0.01）的表达量显着升高,与对照组相比差异具有统计学意义。（3）HE染色情况发现假手术组在光镜下可见肠黏膜结构完整,绒毛排列整齐,细胞如常;ICI组和ICRI组在光镜下可见肠黏膜及绒毛结构受到不同程度的破坏,随着时间的延长,出现黏膜及上皮下间隙的扩张、绒毛顶部的缺失、固有膜的脱落、出血或局部溃疡的形成,同时伴有大量的炎性细胞浸润,在ICR 2.5h组或ICR 3h组开始有所缓解,且在ICR 3h组有淋巴滤泡的形成;ICI组损伤较ICRI程度轻。（4）在ICR后,细胞焦亡相关基因和蛋白的表达都随着再灌注时间的延长而升高,达到峰值后渐趋下降:1)相关mRNA的表达:（1）相较于对照组,细胞焦亡相关的基因caspase-1（ICR 1.5h组,p<0.05）、caspase-11（ICR 2.5h组,p<0.05）和NLRP3（ICR 1/1.5/2/2.5/3h组,p<0.05）表达均升高,差异具有统计学意义;GSDMD在ICR 0.5h组时降低,具有统计学意义（p<0.05）;（2）相较于对照组,与炎症相关的TNF-α（ICR 1.5/2.5h组,p<0.05）、IL-1β（ICR 2/2.5h组,p<0.01）、MCP-1（ICR 2h组,p<0.0001）以及CXCL-1/2（ICR 2h组,p<0.01）均明显升高,差异具有显着统计学意义;2)相关蛋白的表达:（1）相较于对照组,细胞焦亡相关的蛋白AIM2（ICR 1h组,p<0.05）、ASC（ICR 1h组,p<0.01）、caspase-1（ICR 1h组,p<0.05）、GSDMD（ICR 1h组,p<0.01）和参与非经典焦亡途径的caspase-11（ICR 1h组,p<0.01）表达升高,差异具有统计学意义;（2）与炎症相关的IL-1β（ICR 1h组,p<0.01）、IL-18（ICR 1.5/3h组,p<0.01）、TNF-α（6个组,p<0.01）、MCP-1（ICR 2 h组,p<0.01）、CXCL-1/2（ICR 2h组,p<0.01）与对照组相比在实验组表达明显升高,差异具有统计学意义。结论:1.以淤血肠管长度15cm、淤血时间1h为参数成功建立小鼠ICI模型和ICRI模型;2.细胞焦亡的经典途径（由caspase-1介导）和非经典途径（由caspase-11介导）均有参与了ICRI过程;3.经典的促炎因子TNF-α、白介素家族IL-1β和IL-18、MCP-1以及趋化因子家族成员CXCL1/2均有参与到在ICRI炎症反应的发生发展过程中;4.在ICRI过程可造成远隔器官如肝脏和心脏的功能损伤。
张紫森[9]（2019）在《周细胞对脓毒症大鼠血管舒缩和屏障功能的协同保护作用及机制》文中指出脓毒症是ICU中常见的危重病症,其发生率和死亡率均很高。据统计,我国每年有300万脓毒症患者,约100万人死于脓毒症。脓毒症和脓毒性休克的后期会出现血管功能障碍,即血管低反应性和血管渗漏,最终导致多器官功能衰竭,ICU中30%-40%的病人死亡与血管低反应性和血管渗漏有关。针对脓毒症血管低反应性和血管渗漏的发生机制,提出了一系列的治疗措施,但这些措施在纠正血管低反应性和血管渗漏过程中存在矛盾现象,如用缩血管药物增加血管反应性的同时,会导致血管内皮细胞骨架蛋白收缩,加重血管渗漏。目前临床上缺乏协同治疗血管低反应性和血管渗漏的措施。周细胞（Pericyte,PC）是位于小血管、微血管和毛细血管内皮细胞周围、基底膜内的一群具有收缩、分泌和多项分化潜能的细胞。近年来研究发现,周细胞参与炎症、免疫紊乱、血管异常增生等病理生理过程,在多种疾病如癫痫、阿尔兹海默症、糖尿病、心肌缺血、肺纤维化的发生发展过程中发挥重要作用。而周细胞能否协同调控和保护脓毒症后血管舒缩和屏障功能,及其主要作用机制是什么,目前尚不清楚。据此,本研究利用盲肠结扎穿孔（Cecal Ligation and Puncture,CLP）及静脉注射LPS复制SD大鼠和转基因小鼠脓毒症模型,以及LPS刺激血管平滑肌细胞（VSMC）和血管内皮细胞（VEC）,分别从整体及离体水平研究了周细胞对脓毒症血管反应性和血管通透性的协同保护作用及机制。研究内容:第一部分脓毒症周细胞结构和功能的变化及与血管反应性和血管通透性的关系利用CLP及静脉注射LPS复制脓毒症大鼠及小鼠（周细胞荧光标记）模型,观察脓毒症后不同时相点（6h、12h、24h）肠系膜血管周细胞数量和结构的变化;观察肠系膜血管舒缩反应性和血管通透性的变化,及其相关调节蛋白表达的变化,分析脓毒症后周细胞结构和功能的变化与血管反应性和血管通透性间的关系。第二部分输注外源性周细胞对脓毒症大鼠血管低反应性和血管渗漏的协同保护作用利用脓毒症大鼠模型,输注外源性周细胞和功能增强的周细胞（poly（i:C）预刺激）,观察周细胞在肠系膜微静脉上的定植情况,以及输注周细胞后对脓毒症大鼠肠系膜血管舒缩反应性、血管通透性及存活率的影响,以明确周细胞对脓毒症大鼠血管舒缩功能和屏障功能的协同保护作用。第三部分周细胞敲减大鼠血管反应性和血管通透性的变化及输注外源性周细胞对血管舒缩功能和屏障功能的回复作用用CP-673451（PDGFR-β抑制剂）建立周细胞敲减大鼠模型（药物敲减模型）,观察周细胞敲减大鼠在脓毒症后血管反应性和血管通透性的变化情况,以及输注外源性周细胞对血管反应性和血管通透性的回复作用,以进一步明确周细胞对脓毒症大鼠血管反应性和血管通透性的协同保护作用。第四部分周细胞协同调节血管反应性和血管通透性的作用及机制1.周细胞调节血管平滑肌细胞舒缩功能和血管内皮细胞屏障功能的直接作用利用培养的VSMC和VEC,观察正常和LPS刺激下周细胞与VSMC和VEC间直接接触的情况,以及对VSMC舒缩功能和VEC屏障功能的直接调节作用。2.周细胞微囊泡（PCMV）协同调节血管反应性和血管通透性的作用及机制利用培养的周细胞:（1）观察周细胞和功能增强周细胞分泌微囊泡数量的变化;（2）观察PCMV在VSMC和VEC中的吸收情况;（3）观察PCMV对整体动物和离体细胞血管反应性和血管通透性的影响;（4）观察PCMV及Poly（i:C）PCMV所含生长因子、microRNA的数量、种类的变化,观察这些活性物质对VSMC收缩功能和VEC屏障功能的影响。主要研究结果:第一部分脓毒症周细胞结构和功能的变化及与血管反应性和血管通透性的关系1.大鼠CLP和LPS致脓毒症后,肠系膜微血管周细胞数量明显减少、脱落;肠系膜微动脉舒缩反应性降低、血流速度逐渐减慢、肠系膜上动脉p-MLC20表达降低,肠系膜微静脉血管通透性增加、血管内皮细胞明显肿胀、内皮连续性结构破坏、紧密连接明显开放同时伴有红细胞渗出、肠系膜上静脉ZO-1和VE-cadherin表达降低。结果提示脓毒症后周细胞的脱落与血管低反应性和血管渗漏密切相关。2.周细胞荧光标记的小鼠脓毒症后,肠系膜微静脉及毛细血管PDGFR-β荧光表达降低,微血管周细胞脱落;肠系膜微动脉舒缩反应性降低,血管渗漏增加、血管内皮细胞明显肿胀、血管内皮结构破坏。上述结果进一步证实脓毒症后周细胞的脱落与血管低反应性和血管渗漏密切相关。第二部分输注外源性周细胞对脓毒症大鼠血管低反应性和血管渗漏的协同保护作用输注周细胞可定植于肠系膜微静脉上,在输注后24h定植最多。周细胞输注后可明显提升脓毒症大鼠72h的存活率和存活时间,明显改善脓毒症大鼠血管反应性、血管流速及肠系膜上动脉p-MLC20的表达;改善肠系膜血管屏障功能、改善血管内皮细胞结构和增加连接蛋白表达,功能增强（Poly（i:c）预处理）的周细胞效果更好。提示外源性周细胞对脓毒症血管反应性和血管通透性具有协同保护作用。第三部分周细胞敲减大鼠血管反应性和血管通透性的变化及输注外源性周细胞对血管舒缩功能和屏障功能的回复作用周细胞敲减大鼠肠系膜微血管周细胞数量减少、覆盖率明显降低,血管舒缩反应性明显降低,血管通透性明显增加、血管内皮紧密连接明显开放、血管内皮连接蛋白表达明显降低,周细胞输注后可恢复周细胞减少导致的血管舒缩功能和屏障功能的破坏。脓毒症会加重周细胞敲减大鼠的血管低反应性和血管渗漏,输注外源性周细胞可明显改善周细胞敲减大鼠脓毒症后血管反应性、血流速度和肠系膜上动脉p-MLC20表达,改善血管通透性,增加连接蛋白的表达;功能增强（Poly（i:c）预处理）的周细胞效果更好。提示输注外源性周细胞对周细胞敲减大鼠的血管反应性和血管通透性具有回复作用。第四部分周细胞协同调节血管反应性和血管通透性的作用及机制1.周细胞调节血管平滑肌细胞舒缩功能和血管内皮细胞屏障功能的直接作用周细胞与VSMC和VEC可直接接触形成连接,直接调节VSMC的收缩功能和VEC的屏障功能。2.周细胞微囊泡协同调节血管反应性和血管通透性的作用及机制周细胞可通过产生微囊泡（PCMV）协同改善VSMC舒缩功能和VEC屏障功能。机制研究发现,PCMV可通过携带Ang-1、miR-145和miR-132来发挥对VSMC收缩功能和VEC屏障功能的协同保护作用。miR-145主要作用于VSMC,抑制Sphk2和S1PR1表达,增加S1PR2和p-MLC20的表达,改善血管平滑肌细胞舒缩功能;miR-132主要作用于VEC,抑制Sphk2和S1PR2的表达,增加S1PR1、ZO-1和VE-cadherin的表达,改善血管内皮细胞屏障功能。提示周细胞主要通过分泌微囊泡携带Ang-1、miR-145和miR-132作用于血管平滑肌细胞和血管内皮细胞,实现对脓毒症血管反应性和血管通透性的协同调控和保护作用。结论:1.脓毒症后肠系膜微血管周细胞结构破坏、数量减少、覆盖率降低,在血管低反应性和血管渗漏中发挥重要作用。2.输注外源性周细胞可协同改善脓毒症血管低反应性和血管渗漏。3.周细胞敲减大鼠肠系膜微动脉收缩和舒张反应性明显下降,血管通透性明显增加,输注周细胞后可明显恢复周细胞减少导致的血管舒缩功能和内皮屏障功能损伤。4.周细胞可通过直接接触和分泌微囊泡协同保护脓毒症血管反应性和血管通透性。直接作用主要是周细胞与VSMC和VEC直接接触形成紧密和缝隙连接,产生物理覆盖和调节作用。旁分泌作用主要是周细胞分泌内含多种活性物质的微囊泡来发挥作用,如Ang-1、miR-145和miR-132。一方面周细胞分泌携带Ang-1的微囊泡,传递至VSMC和VEC,增加血管平滑肌细胞舒缩功能和血管内皮细胞屏障功能。另一方面,周细胞通过分泌携带miR-145和miR-132的微囊泡来发挥协同保护作用,其中miR-145主要在血管平滑肌细胞中起作用,它主要是通过降低Sphk2和S1PR1的表达,增加S1PR2和p-MLC20的表达来发挥作用;miR-132主要在血管内皮细胞中起作用,它主要是通过降低Sphk2和S1PR2的表达,增加S1PR1、ZO-1和VE-cadherin的表达来发挥作用。
黄天安[10]（2019）在《CT灌注联合能谱成像在评估兔骨骼肌缺血再灌注损伤中的应用》文中进行了进一步梳理第一部分 兔下肢骨骼肌CT灌注联合能谱成像的可行性研究目的:评价CT灌注联合能谱成像定量评估兔下肢骨骼肌血流动力学的可行性。方法:8只新西兰大白兔经速眠新、戊巴必妥钠麻醉后固定,采用GE revolution CT,选定双下肢最大范围层面作为灌注扫描层面,覆盖范围16cm,行灌注联合能谱扫描。后处理及测量由两位医师独立完成,获得灌注参数血流量（blood flow,BF）、血容量（blood volume,BV）、平均通过时间（mean transit time,MTT）、达峰时间（time to peak,TTP）及能谱参数碘值（Energy spectrum iodine value,EI）。比较大腿和小腿各感兴趣各测量参数差异。Bland-Altman一致性分析评估两位医师测量结果的可重复性。结果:兔下肢动脉解剖走形与人类相当,各灌注伪彩图示下肢骨骼肌血流灌注丰富。大腿和小腿肌肉群各参数值如下:BF为（5.56 ± 0.06）ml/100g/min和（5.49 ± 0.13）ml/100g/min,BV 为（1.76+0.05）ml/100g 和（1.73 ± 0.1）ml/100g,MTT 为（19.33+0.86）S 和（19.00 ± 1.12）S,TTP 为（87.0 ± 4.67）S 和（87.6 ± 6.4）S,EI 为（6.44 ± 0.34）gg/mL和（6.46 ± 0.33）μg/mL。大腿的BF、BV、MTT值较小腿稍高,TTP稍小于小腿,碘值与小腿相当,各参数均无统计学差异（P>0.05）。两位医师测量结果具有较好的一致性（差值均数分别为0.04、0.03、-1.0、1.0、-0.07）。结论:运用CT灌注联合能谱扫描功能成像技术评估兔下肢骨骼肌血流动力学是可行的。第二部分 CT灌注联合能谱成像在评估兔骨骼肌缺血再灌注损伤中应用目的:探讨CT灌注联合能谱成像在评估兔骨骼肌缺血再灌注损伤中的价值。方法:35只新西兰实验白兔随机分为7组:A组为假手术组;B组为缺血4h再灌注即刻组;C组为缺血4h再灌注6h组;D组为缺血4h再灌注12h组;E组为缺血4h再灌注18h组;F组为缺血4h再灌注24h组;G组为缺血4h再灌注30h组。实验组行右侧腹股沟区切开,分离股总动脉后以微血管夹夹闭。缝合局部切口于缺血4h开放闭塞段血管夹。按照实验设计于不同再灌注时点行下肢功能CT检查。得到CT灌注参数值血流量（BF）、血容量（BV）、平均通过时间（MTT）、达峰时间（TTP）、能谱参数碘值（Energy spectrum iodine value,EI）,计算右下肢与左下肢各参数比值,即rBF、rBV、rMTT、rTTP、rEI。假手术组仅暴露右侧股总动脉,未行夹闭,于相应时间点行CT检查。扫描结束时,处死动物并采集股四头肌新鲜组织标本,测定丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性,并行病理学检查（HE染色）了解组织损伤程度。比较实验各组CT功能参数比值变化差异,评估相关参数比值与MDA、SOD的相关性。结果:随再灌注时间延长,患健侧血流量比值（rBF）、血容量比值（rBV）、碘值比值（rEI）呈下降趋势,平均通过时间比值（rMTT）呈上升趋势。再灌注12h、18h、24h、30h 组血流量比值 rBF 值低于假手术组[（0.78±0.07）vs（1.01±0.08）,P=0.002;（0.70±0.08）vs（0.99±0.10）,P=0.001;（0.64±0.07）vs（1.01±0.13）,P=0.001;（0.65±0.09）vs（1.01±0.09）,P=0.001]。再灌注 12h、18h、24h、30h 组血容量比值 rBV 值低于假手术组[（0.85±0.08）vs（1.04±0.13）,P=0.029;（0.75±0.09）vs（0.99±0.14）,P=0.015;（0.67±0.09）vs（1.01±0.17）,P=0.005;（0.68±0.09）vs（1.03±0.14）,P=0.002]。再灌注 18h、24h、30h 组碘含量比值 rEI 值低于假手术组[（0.72±0.07）vs（1.00±0.22）,P=0.045;（0.70±0.08）vs（1.04±0.14）,P=0.002;（0.71±0.09）vs（1.02士0.15）,P=0.005]。再灌注即刻、6h、12h、18h、24h、30h的rMTT、rTTP值与假手术组相比无统计学差异。六组再灌注间rBF、rBV、rMTT、rEI值差异均具有统计学意义（F=10.781、9.167、24.994 和 10.777,P=0.000、0.000、0.000 和 0.000）,rTTP 值差异则无统计学意义（F=0.391,P=0.850）。rBF、rBV 和 rEI 与 SOD 值呈强正相关（r=0.638,P=0.000;r=0.592,P=0.001;r=0.575,P=0.001）,与 MDA 值呈中等强度负相关（r=-0.401,P=0.028;r=-0.394,P=0.031;r=-0.410,P=0.024）。HE染色可见:假手术A组前后无明显差异,无炎症反应、肌纤维变性及组织肿胀。再灌注各组表现为不同程度的炎症反应、肌纤维变性以及组织肿胀。六组间病理评分有明显的统计学意义（F=14.273 P=0.000）,其中相邻时间点以再灌注12h和18h病理评分有统计学意义（P=0.040）,余相邻组间无统计学意义。结论:1)CT灌注联合能谱成像技术可较精确地评估兔下肢骨骼肌再灌注的微循环变化。2)CT功能成像参数比值rBF、rBV、rEI与生化标记物MDA、SOD具有良好的相关性。
二、肠缺血-再灌流大鼠远隔脏器受损与中性粒细胞粘附扣留的关系（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、肠缺血-再灌流大鼠远隔脏器受损与中性粒细胞粘附扣留的关系（论文提纲范文）
（1）右美托咪定对脓毒症患者外周血HMGB1、D-Lac、I-FABP表达的研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 右美托咪定对脓毒症肠屏障功能保护作用的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（2）IVIM-DWI对兔小肠缺血再灌注损伤的评价（论文提纲范文）
| 中英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 本研究局限性 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述:小肠缺血再灌注损伤诊断的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（3）远隔缺血适应治疗症状性颅内动脉粥样硬化性狭窄的临床研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 研究内容与方法 |
| 1 研究对象 |
| 1.1 入选标准 |
| 1.2 排除标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 随机化分组 |
| 2.2 治疗方法 |
| 2.3 评估指标 |
| 2.3.1 基线评估指标 |
| 2.3.2 临床评估 |
| 2.4 临床终点事件 |
| 2.5 不良反应 |
| 2.6 随访观察 |
| 2.7 技术路线图 |
| 3 统计学方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 远隔缺血适应治疗的相关研究进展 |
| 参考文献 |
| 作者简介及读研期间主要科研成果 |
| 致谢 |
（4）参苓白术散治疗重症肺炎患者并发胃肠功能障碍的临床研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词对照表 |
| 引言 |
| 临床研究 |
| 1 临床资料 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 病例选择标准 |
| 1.3 患者知情同意 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 研究设计 |
| 2.2 样本量计算 |
| 2.3 随机方法 |
| 2.4 治疗方案 |
| 2.5 观察指标及评价标准 |
| 2.6 数据整理 |
| 2.7 统计分析 |
| 2.8 技术路线图 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 基线分析 |
| 3.2 临床疗效分析 |
| 3.3 亚组分析 |
| 3.4 安全性评价 |
| 讨论 |
| 1 现代医学对重症肺炎患者并发胃肠功能障碍的研究进展 |
| 1.1 病理机制研究 |
| 1.2 临床主要表现 |
| 1.3 西医治疗进展 |
| 2 祖国医学对重症肺炎患者并发胃肠功能障碍的研究进展 |
| 2.1 重症肺炎患者并发胃肠功能障碍的中医认识 |
| 2.2 中医治疗进展 |
| 2.3 健脾益肺法的理论依据 |
| 2.4 参苓白术散的方药分析及现代药理研究 |
| 3 研究结果的分析 |
| 3.1 基线分析 |
| 3.2 胃肠功能变化分析 |
| 3.3 CPIS评分变化分析 |
| 3.4 炎症指标变化分析 |
| 3.5 亚组分析 |
| 3.6 安全性分析 |
| 结论 |
| 问题与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附件 |
| 附件一:文献综述 现代医学对重症肺炎患者并发胃肠功能障碍的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附件二:食欲视觉模拟评分 |
| 附件三:临床肺部感染评分表 |
| 附件四:在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
（5）创伤失血性休克时氨甲环酸保护肠粘膜屏障的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 常用缩略词表 |
| 绪论 |
| 参考文献 |
| 第一部分 氨甲环酸对创伤失血性休克肠粘膜屏障损伤的影响 |
| 1、引言 |
| 2、材料与方法 |
| 3、研究结果 |
| 4、讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 氨甲环酸给药时间与剂量对创伤失血性休克肠粘膜屏障损伤的影响 |
| 1、引言 |
| 2、材料与方法 |
| 3、研究结果 |
| 4、讨论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 中性粒细胞胞外诱捕网对氨甲环酸保护肠粘膜屏障的机制研究 |
| 1、引言 |
| 2、材料与方法 |
| 3、研究结果 |
| 4、讨论 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 综述:创伤失血性休克肠屏障损伤机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间已发表的文章 |
| 致谢 |
（6）异丙酚预处理通过NLRP3/caspase-1信号通路减轻大鼠肠缺血再灌注损伤作用及机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 英汉缩略词对照表 |
| 异丙酚的器官保护作用及其主要机制的研究进展 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（7）右美托咪定和羟考酮对下肢缺血再灌注导致的局部及脑损伤的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 右美托咪定与羟考酮对肢体缺血再灌注患者保护效应的对比研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 右美托咪定和羟考酮对下肢缺血再灌注局部肢体的保护效应 |
| 第一章 右美托咪定和羟考酮对下肢缺血再灌注后肢体血流的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二章 探讨右美托咪定和羟考酮减轻下肢缺血再灌注损伤的机制 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 右美托咪定和羟考酮改善下肢缺血再灌注后骨骼肌线粒体功能 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 右美托咪定和羟考酮对下肢缺血再灌注导致脑损伤的影响 |
| 第一章 右美托咪定和羟考酮对下肢缺血再灌注导致学习记忆功能受损的对比研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二章 右美托咪定和羟考酮对海马神经元s EPSC及下肢I/R后海马NR2B表达的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 炎症反应与认知功能障碍的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）细胞焦亡在小鼠肠淤血再灌注损伤中的作用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物及分组 |
| 2.1.2 主要仪器和器械 |
| 2.1.3 常用试剂 |
| 2.1.4 常用工作液的配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 建立小鼠ICI模型和ICRI模型 |
| 2.2.2 标本采集 |
| 2.2.3 肝脏功能和心肌酶检测 |
| 2.2.4 HE染色观察小鼠淤血小肠组织的病理学改变 |
| 2.2.5 ICRI中细胞焦亡和炎症相关基因表达的实时荧光定量检测 |
| 2.2.6 ICRI中细胞焦亡和炎症相关蛋白表达的免疫印迹法检测 |
| 2.2.7 统计学分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 小鼠ICI模型和ICRI模型的建立 |
| 3.1.1 小鼠ICI模型的建立 |
| 3.1.2 小鼠ICRI模型的建立 |
| 3.2 小鼠ICRI后不同时间点肝功能和心肌酶的表达 |
| 3.3 小鼠小肠组织病理学改变(HE染色) |
| 3.3.1 小鼠ICI后小肠组织病理学改变 |
| 3.3.2 小鼠ICRI后小肠组织病理学改变 |
| 3.3.3 小鼠ICRI后肝脏组织病理学改变 |
| 3.4 RT-PCR检测ICRI后细胞焦亡和炎症相关基因的表达情况 |
| 3.4.1 小肠NLRP3基因的表达 |
| 3.4.2 小肠caspase-1 基因的表达 |
| 3.4.3 小鼠ICRI后小肠caspase-11 基因的表达 |
| 3.4.4 小肠IL-1β基因的表达 |
| 3.4.5 小鼠ICRI后小肠IL-18 基因的表达 |
| 3.4.6 小肠TNF-α基因的表达 |
| 3.4.7 小肠MCP-1基因的表达 |
| 3.4.8 小肠CXCL-1/2/10基因的表达 |
| 3.4.9 小肠GSDMD基因的表达 |
| 3.4.10 小肠ASC基因的表达 |
| 3.5 Western Blot检测ICRI后细胞焦亡相关蛋白的表达情况 |
| 3.5.1 小肠组织中AIM2蛋白的表达 |
| 3.5.2 小肠组织中caspase-1 蛋白的表达 |
| 3.5.3 小肠组织中caspase-11 蛋白的表达 |
| 3.5.4 小肠组织中ASC蛋白的表达 |
| 3.5.5 小肠组织中IL-18蛋白的表达 |
| 3.5.6 小肠组织中IL-1β蛋白的表达 |
| 3.5.7 小肠组织中TNF-α蛋白的表达 |
| 3.5.8 小肠组织中GSDMD蛋白的表达 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 第六章 论文的不足之处 |
| 参考文献1 |
| 文献综述 |
| 参考文献2 |
| 在学期间的研究成果 |
| 缩略词表 |
| 致谢 |
（9）周细胞对脓毒症大鼠血管舒缩和屏障功能的协同保护作用及机制（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| Abstract |
| 摘要 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 周细胞对脓毒症大鼠血管舒缩和屏障功能的协同保护作用及机制 |
| 2.1 材料和实验方法 |
| 2.2 实验结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 白藜芦醇对脓毒症大鼠血管舒张功能的保护作用及机制 |
| 3.1 材料和实验方法 |
| 3.2 实验结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 周细胞在血管相关疾病中的作用及调控研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 |
| 致谢 |
（10）CT灌注联合能谱成像在评估兔骨骼肌缺血再灌注损伤中的应用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ENGLISH ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一部分 下肢骨骼肌CT能谱联合灌注成像的可行性研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附件 |
| 第二部分 CT能谱联合灌注成像在评估兔骨骼肌缺血再灌注损伤中应用 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述 CT功能成像在缺血再灌注损伤评估方面的应用 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间公开发表的论文 |
| 中英文缩略词表 |
| 致谢 |
四、肠缺血-再灌流大鼠远隔脏器受损与中性粒细胞粘附扣留的关系（论文参考文献）
- [1]右美托咪定对脓毒症患者外周血HMGB1、D-Lac、I-FABP表达的研究[D]. 余黎媛. 昆明医科大学, 2021(01)
- [2]IVIM-DWI对兔小肠缺血再灌注损伤的评价[D]. 彭永会. 遵义医科大学, 2021(01)
- [3]远隔缺血适应治疗症状性颅内动脉粥样硬化性狭窄的临床研究[D]. 李承霞. 皖南医学院, 2021
- [4]参苓白术散治疗重症肺炎患者并发胃肠功能障碍的临床研究[D]. 邓婉君. 成都中医药大学, 2020(02)
- [5]创伤失血性休克时氨甲环酸保护肠粘膜屏障的机制研究[D]. 储诚南. 南京大学, 2020(02)
- [6]异丙酚预处理通过NLRP3/caspase-1信号通路减轻大鼠肠缺血再灌注损伤作用及机制[D]. 张力尹. 西南医科大学, 2020(12)
- [7]右美托咪定和羟考酮对下肢缺血再灌注导致的局部及脑损伤的影响[D]. 程文杰. 河北医科大学, 2020(01)
- [8]细胞焦亡在小鼠肠淤血再灌注损伤中的作用研究[D]. 陈亚惊. 兰州大学, 2020(01)
- [9]周细胞对脓毒症大鼠血管舒缩和屏障功能的协同保护作用及机制[D]. 张紫森. 中国人民解放军陆军军医大学, 2019(03)
- [10]CT灌注联合能谱成像在评估兔骨骼肌缺血再灌注损伤中的应用[D]. 黄天安. 苏州大学, 2019(04)