一、胆汁酸对结肠癌细胞环氧合酶2表达及前列腺素E2合成作用的研究（论文文献综述）
汪戎锦[1]（2021）在《基于代谢组学的刺五加叶治疗缺血性脑卒中作用机制研究》文中研究指明缺血性脑卒中作为全球性的公共健康问题,危害着全世界人类的健康,并以其高发病率和高死亡率,引起了科学家们的广泛关注。缺血性脑卒中发生的主要原因为凝结的血栓或栓子阻塞在脑动脉中使大脑供血受限从而引起氧气和营养的供应不足。刺五加叶作为一种可再生资源,因其化学成分以及药效作用与刺五加根相似,被广泛用于脑血管疾病、缺血性心脏病等疾病的治疗。本实验室在前期的研究工作中筛选并制备了刺五加叶的主要活性组分,并采用药效学研究证明了刺五加叶具有抗氧化、抑制细胞损伤以及缺血性脑卒中的保护作用。然而,刺五加叶的化学成分复杂,在体内作用于多个靶点,致使其治疗缺血性脑卒中的整体作用机制研究尚不够深入,目前缺乏系统研究,在一定程度上限制了刺五加叶的开发及应用。代谢组学作为一种系统生物学研究方法,能够对内源性小分子的整体变化进行系统分析,逐渐成为揭示病机复杂疾病的发病机理,和多成分、多靶点药物作用机制的一种强有力工具。因此,本研究围绕脂质异常、神经损伤以及菌群失调等缺血性脑卒中的关键病理环节,采用基于质谱技术的多样本（血清、粪便、尿液、脑组织）代谢组学的研究方法,对刺五加叶治疗缺血性脑卒中的作用机制进行了深入研究,并阐明其科学内涵。主要研究内容包括以下几个方面:1.刺五加叶治疗缺血性脑卒中的血清脂质组学及其神经保护作用研究首先对刺五加叶的主要活性组分进行基于UPLC方法的成分分析。结果表明,刺五加叶的主要活性组分含有有机酸类化合物、黄酮类化合物和糖苷。其次,建立大鼠缺血性脑卒中疾病模型,并给予刺五加叶治疗四周。由于脂质异常、神经损伤、氧化应激和炎症反应是缺血性脑卒中发作的四个主要方面,本文围绕以上四个方面展开了研究。首先,采用基于UPLC-Q-TOF/MS的脂质组学方法,研究缺血性脑卒中发生后大鼠血清脂质的代谢紊乱,以及刺五加叶的调节作用。利用UPLC-Q-TOF/MS采集刺五加叶给药四周后缺血性脑卒中大鼠血清样本的脂质代谢轮廓,结合Progenesis QI软件进行包括多元统计学分析、潜在脂质标记物鉴定以及通路分析在内的数据处理。共鉴定出27种脂质组学生物标记物,包括PC,PE,SM和TG类脂质,分布在各种脂质代谢途径中,包括甘油磷脂、亚油酸、α-亚麻酸、甘油脂、鞘脂和花生四烯酸代谢途径。结果表明,刺五加叶能够调节缺血性脑卒中发生发展过程中出现的脂质代谢紊乱。其次,针对缺血性脑卒中发生时的神经损伤过程,采用UPLC-TQ/MS对大鼠脑组织及血清中10种神经递质进行了定量研究。结果表明,缺血性脑卒中能够导致谷氨酸（Glu）,天冬氨酸（Asp）等兴奋性氨基酸的过度释放,产生神经毒性,还能够增加γ-氨基丁酸（GABA）、五羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NE）、肾上腺素（E）、多巴胺（DA）以及牛磺酸（Tau）的含量,并降低抑制性神经递质甘氨酸（Gly）以及神经炎症调节剂乙酰胆碱（Ach）的含量。而给予刺五加叶治疗后,能够使以上神经递质在脑组织和血清中的水平均向正常水平调节,说明其能够通过调节缺血性脑卒中大鼠的神经递质含量发挥保护中枢神经系统的作用。最后,通过MDA和SOD的定量分析,检测缺血性脑卒中后氧化应激程度,通过TNF-α,IL-6和IL-10的定量分析,检测炎症反应程度。结果表明,刺五加叶可以在一定程度上减轻机体的氧化应激和炎症损伤,从而减轻缺血性脑卒中对机体的损伤。从调节脂质代谢紊乱、神经损伤、氧化应激反应以及炎症反应等方面揭示了刺五加叶治疗缺血性脑卒中的作用机制。2.刺五加叶治疗缺血性脑卒中粪便代谢组学研究及其对微生物-肠-脑轴的影响微生物-肠-脑轴双向通讯系统与缺血性脑卒中的发生及预后相互关联,这种关联作用近年来逐渐引起科学家的广泛关注。本文采用基于UPLC-Q-TOF/MS的粪便非靶向代谢组学方法,结合基于UPLC-TQ/MS的粪便胆汁酸靶向代谢组学方法,以及16S r RNA粪便菌群测序,研究了刺五加叶对缺血性脑卒中模型大鼠微生物-肠-脑轴的平衡作用。首先,利用UPLC-Q-TOF/MS采集刺五加叶治疗四周后缺血性脑卒中大鼠粪便样本的代谢轮廓,结合多元统计学分析筛选具有显着差异的潜在生物标记物,并进行通路分析,共鉴定出40个潜在的差异性生物标记物,主要涉及花生四烯酸代谢通路、不饱和脂肪酸的生物合成途径、胆汁酸的生物合成途径、鞘脂代谢通路等。以上生物标记物的含量在缺血性脑卒中发生后具有显着的变化,而刺五加叶可以调节其含量以恢复正常状态。其次,基于UPLC-TQ/MS的靶向代谢组学方法对13种胆汁酸进行了定量分析。结果显示,缺血性脑卒中发生时,大鼠粪便胆汁酸发生代谢紊乱,刺五加叶能够调节多种胆汁酸的含量,使其更加趋近于正常水平。最后,16S r RNA菌群测序结果表明,缺血性脑卒中可导致大鼠肠道内病原体富集,益生菌水平大幅降低,而刺五加叶能够使缺血性脑卒中大鼠体内病原体含量降低,同时增加益生菌水平。上述结果揭示了刺五加叶具有对缺血性脑卒中大鼠微生物-肠-脑轴的调节作用,为阐明刺五加叶治疗缺血性脑卒中的作用机制研究奠定基础。3.刺五加叶通过对益生菌的调节作用治疗缺血性脑卒中的机制验证选择能够被刺五加叶调节的益生菌给药缺血性脑卒中大鼠,验证给药刺五加叶后,益生菌水平的升高是发挥其治疗效果的重要因素之一。首先,培养罗伊氏乳酸杆菌以及丁酸梭菌并制备菌液,分别给予缺血性脑卒中大鼠以上两种菌液。经四周给药后,检测大鼠粪便的菌群组成。结果表明,与模型组比较,益生菌给药后的缺血性脑卒中大鼠粪便中菌群组成与含量产生较大变化,并与对照组大鼠粪便菌群组成更为相似。其次,采用基于UPLC-TQ/MS的定量方法检测缺血性脑卒中大鼠经益生菌给药后,脑组织中神经递质的含量变化。结果表明,给予两种益生菌后,具有神经毒性的神经递质含量降低,而具有神经调节作用的神经递质含量显着升高,更加趋近于健康大鼠。最后,通过ELISA法检测大鼠血清和脑组织中多种炎症因子IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α的含量和脑组织中MDA、SOD、COX-2、MAO的含量。结果表明,当缺血性脑卒中发生时,大鼠体内IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、COX-2和MAO含量显着升高,而IL-10和SOD含量显着降低。给予两种益生菌后,缺血性脑卒中大鼠体内以上指标的含量均能够被调节至正常水平,推测两种益生菌均能够通过减轻炎症及氧化应激损伤,对机体产生一定的保护作用。本研究验证了刺五加叶能够通过影响微生物-肠-脑轴的代谢,增加体内益生菌丰度,调节卒中引起的神经损伤、炎症反应以及氧化应激损伤,从而起到对机体的保护作用。4.刺五加叶治疗缺血性脑卒中的尿液代谢组学研究尿液样本能够准确、灵敏地反映机体的代谢变化,为代谢组学研究中最重要的生物样本。采用基于UPLC-Q-TOF/MS的非靶向尿液代谢组学方法对刺五加叶治疗缺血性脑卒中的作用机制进行研究并验证。采用UPLC-Q-TOF/MS采集大鼠尿液样本的代谢轮廓,结合Progenesis QI软件进行数据处理,筛选并鉴定潜在生物标记物,构建基因-酶-生物标记物代谢网络。本研究共筛选出42种在缺血性脑卒中疾病进程中具有显着变化的潜在生物标记物,经刺五加叶治疗后,38种生物标记物的含量变化能够被显着调节,涉及体内牛磺酸和次牛磺酸代谢通路、花生四烯酸代谢通路、半胱氨酸和蛋氨酸代谢通路、类固醇激素生物合成途径、色氨酸代谢通路、酪氨酸代谢通路和嘧啶代谢途径等多种代谢途径的调节作用。最后,选择3种与以上通路相关的关键酶COX-2,NOS和MAO作为刺五加叶治疗的靶点酶,进行定量验证。结果表明,模型大鼠经刺五加叶治疗后血清和脑组织中三种酶的含量与假手术组大鼠相似,证明了刺五加叶可以通过调节以上三种酶的含量发挥刺五加叶治疗缺血性脑卒中的作用。本实验结果有助于进一步了解缺血性脑卒中的发病机制,并为刺五加叶的潜在治疗机制研究提供科学依据。5.基于高效同位素标记衍生化的刺五加叶治疗缺血性脑卒中尿液代谢组学研究高效化学同位素标记（CIL）衍生化结合液质联用（LC-MS）的代谢组学方法是使用靶向特定官能团的试剂标记生物样本,使所有具有相同官能团的代谢物生成相应的衍生代谢物,在提高总体代谢组学覆盖率的同时,将同位素引入标记代谢物中,使重同位素试剂衍生的代谢产物作为轻同位素试剂衍生代谢物产物的内标,从而提高代谢产物的定性及定量精度。本研究采用基于CIL LC-MS的刺五加叶治疗大鼠缺血性脑卒中的尿液代谢组学方法,分别对胺/酚类亚代谢组和羧酸类亚代谢组进行分析研究。结果表明,刺五加叶能够通过体内多种通路调节缺血性脑卒中发生后的代谢紊乱,与传统尿液代谢组学研究结果相比,CIL LC-MS法筛选出了更多潜在生物标记物,并覆盖更多体内代谢通路,得到了覆盖率更广、定量更精准的代谢组学结果。同时,在每条通路中匹配到更多的具有显着差异的代谢产物,明确通路中上游化合物及下游产物的显着变化及机制,使针对各通路的研究更加全面。最终,从神经保护、调节能量代谢、抑制炎症损伤、拮抗氧化应激的角度对刺五加叶治疗缺血性脑卒中的作用机制进行系统阐述。进而为刺五加叶治疗缺血性脑卒中的作用机制提供更加全面的科学依据。综上所述,本论文采用基于大鼠血清、粪便、尿液以及脑组织多种生物样本的代谢组学方法,进行刺五加叶治疗大鼠缺血性脑卒中作用机制的系统研究。将尿液和粪便的非靶向代谢组学研究,与血清脂质、脑组织神经递质以及粪便胆汁酸的靶向代谢组学研究相结合,明确刺五加叶对缺血性脑卒中大鼠体内多种代谢通路的调节作用,对脂质紊乱的调节作用,以及对神经系统的保护作用。其次,通过对大鼠粪便的菌群分析和验证实验,阐述刺五加叶可能通过调节微生物-肠-脑轴双向通讯系统发挥缺血性脑卒中的治疗作用,推测刺五加叶增加肠道益生菌含量是其发挥缺血性脑卒中治疗作用的关键因素之一。并采用基于高效同位素标记结合LC-MS的代谢组学方法,对体内胺/酚类亚代谢组及羧酸类亚代谢组进行全面分析,从神经保护、调节能量代谢、抑制炎症损伤、拮抗氧化应激的角度系统阐述刺五加叶治疗缺血性脑卒中的作用机制。本研究结合先进的分析技术手段,探讨中药的作用机制,为阐明刺五加叶治疗缺血性脑卒中的作用机制提供理论依据,同时也为中药作用机制的系统研究提供了新的方法路线。
赵浩安[2]（2021）在《基于多组学的中蜂蜂蜜对氧化应激相关炎症反应的影响机制研究》文中指出在健康中国战略的实施背景下,挖掘具有特定营养健康功效的食品已成为食品科学领域的研究热点,富含抗氧化剂的食物有助于改善由氧化应激及其他相关因素引起的炎症反应。蜂蜜不仅因其独特的风味深受消费者的喜爱,而且作为天然膳食抗氧化剂也具有广泛的药理学活性和生物学功能;其中,中华蜜蜂蜂蜜（简称中蜂蜂蜜）作为我国特有的蜂蜜品种和民间药物,用于解酒保肝、润肠通便等已有几千年的历史。研究其对氧化应激相关炎症反应的影响是揭开中蜂蜂蜜与人类健康关系的关键所在。本论文通过食品组学的方法,在分析中蜂蜂蜜化学组成、体外抗氧化活性及其对血清代谢表型影响的基础上,系统研究其对酒精性肝损伤、溃疡性结肠炎及代谢紊乱等常见氧化应激相关炎症反应的干预作用及机制。该研究可为蜂产品抗氧化功能食品的开发提供参考,亦可为多组学技术在食品生物活性领域中的应用提供新思路。全文共分六章,作者的主要贡献如下:1.在测定和表征中蜂蜂蜜理化性质、营养组成及酚类化合物的基础上,通过化学模型和细胞模型评价中蜂蜂蜜的体外抗氧化活性。结果表明,中蜂蜂蜜总酚含量为345.1-502.1 mg/kg,抗坏血酸含量为153.8-385.4 mg/kg;咖啡酸和芦丁是中蜂蜂蜜的主要酚类化合物,平均含量分别为30.4 mg/kg和11.9 mg/kg;此外,中蜂蜂蜜具有较强的DPPH自由基清除活性(IC50 87.5-136.2 mg/m L)、Fe3+还原能力（176.5-317.4 mg Trolox/kg）、Fe2+螯合能力（22.8-35.5 mg Na2EDTA/kg）以及对H2O2诱导的DNA氧化损伤的保护作用（保护率为65.7%）。2.通过代谢组学方法研究了中蜂蜂蜜酚类化合物对大鼠血清抗氧化能力和代谢表型的影响。结果表明,血清抗氧化能力的增强与酚类、脂肪酸类和氨基酸类等25种生物标志物有关,这些生物标志物主要涉及三条代谢通路:与COX和LOX途径相关的花生四烯酸代谢通路、与活性氮产生相关的精氨酸代谢通路以及核因子κB信号通路。3.以酒精诱导的肝损伤模型为对象,探究中蜂蜂蜜的长期摄入对小鼠肝损伤的保护作用,重点关注其对肝损伤小鼠氧化应激的干预作用。结果表明,连续12周的中蜂蜂蜜摄入显着抑制血清脂蛋白氧化、提高血清氧自由基吸收能力（p<0.05）,能够抑制血清ALT和AST的升高、降低肝脏MDA含量,提高SOD和GSH-Px活性、抑制血清和肝脏中TGF-β1水平,证实了中蜂蜂蜜通过干预氧化应激及炎症反应保护酒精诱导的小鼠急性肝损伤。4.基于肠道微生物组学研究中蜂蜂蜜及其成分对DSS诱导的大鼠溃疡性肠炎的影响及其机制。结果表明,蜂蜜及其酚类化合物的摄入显着提高肠组织SOD和GSH-Px水平,降低NO含量、MPO活性、炎症因子TNF-α、TGF-β1和IL-6水平,同时下调IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ基因表达,上调IκB-α基因表达。此外,中蜂蜂蜜和阳性对照药物（柳氮磺胺吡啶）表现出相似的肠道微生物菌群结构和差异菌群变化。在属水平上,中蜂蜂蜜显着减少了拟杆菌、棒状杆菌和变形杆菌的数量。相关分析表明,中蜂蜂蜜调控的结肠基因表达与肠道差异菌群有关。5.结合代谢组学、肠道微生物组学和转录组学技术,研究蜂蜜和同等比例糖水摄入对正常小鼠和代谢紊乱小鼠的影响。结果表明,中蜂蜂蜜通过降低血清TC和LDL-C水平、调节肠道微生物菌群组成降低正常小鼠的代谢紊乱风险,并且通过改善肝脏脂质合成、干预氧化应激稳态及炎症反应、重塑肠道微生物菌群及短链脂肪酸代谢物改善代谢紊乱小鼠的氧化应激相关炎症反应。
宋雪晴[3]（2020）在《基于乳腺癌分型和炎性微环境设计的Pt（Ⅳ）前药分子的研究》文中提出乳腺癌是威胁女性健康的头号杀手,2011年St.Gallen专家共识首次透过形态学“现象”分析了分子“本质”,即根据其雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体2（HER2）分子的表达差异,将乳腺癌分为不同亚型,包括Luminal A型、Luminal B型、HER2阳性型以及三阴性乳腺癌（TNBC）,这一突破性进展对于临床精准治疗方案的设计具有重大意义。此外,受肿瘤炎性微环境影响,肿瘤转移复发也成为临床乳腺癌治疗的关键。顺铂,作为一线抗癌药物在临床被广泛使用,具有药效强,抗癌谱广的优点,但由于其选择性和溶解性差引起的毒副作用及固有/获得性耐药问题的存在,严重影响了患者的治疗效果。近年来,随着铂药研究不断深入,Pt（Ⅳ）化合物以其独特的稳定性和结构可塑性在众多研究中脱颖而出。其遵循前药作用模式,呈动力学惰性且较少引起副作用;同时轴向配体的引进增强了药效,改变传统Pt（Ⅱ）药的入胞模式,促进摄取,提高生物利用度,有效克服耐药问题等;入胞后释放出配体与铂药母核,发挥高效协同抗癌功效,改善传统意义的联合给药缺陷。因此,本文选取了一系列对乳腺癌分型和肿瘤炎性微环境特征具有独特药理活性的分子,作为配体引入到Pt（Ⅳ）轴向位置上,旨在开发靶向型精准药物,有效克服乳腺癌临床治疗缺陷,减少化疗造成的毒副作用。目的:针对乳腺癌分型、肿瘤炎性微环境和铂药的临床缺陷,本文设计合成了一系列具有靶向作用的Pt（Ⅳ）前药分子,使其在乳腺癌细胞内发挥高效协同作用,并降低药物的系统毒性。方法:本研究选取具有（或修饰后具有）羧基、氨基活性基团的褪黑素、酮基布洛芬、依托度酸、卡洛芬、舒林酸等衍生物分别与羟基铂进行缩合获得Pt（Ⅳ）前药分子候选物,并通过核磁氢谱、碳谱、高分辨质谱、高效液相色谱等方法对所得化合物进行结构及理化性质表征。采用MTT、ICP-MS、流式细胞术、Western blot、Hoechst染色、免疫荧光、彗星、划痕侵袭等实验对药物的作用机制进行探索;建立荷瘤裸鼠模型,制作H&E染色切片对药物的抑瘤活性及体内毒性进行评估。结果:一、ER阳性乳腺癌在临床最为常见,ER通过与雌激素结合发挥生物学效应。褪黑素作为人体内源性产物与乳腺癌的发生密切相关,且对雌激素相关酶类和受体具有调节作用。基于此,本文首次设计合成4个褪黑素-Pt（Ⅳ）前药分子Melatplatin。其中化合物3对ER阳性MCF-7细胞具有突出的选择性且细胞毒性较顺铂提高近100倍,这与3的受体亲和力增强并有效抑制ER表达的结果相吻合。化合物3在胞内大量蓄积并还原释放出铂药母核与配体MT来发挥药物的协同作用,诱导严重的S期阻滞和DNA损伤,上调γH2AX和P53表达。在体内,化合物3造成肿瘤组织的严重坏死并缓解系统毒性。此外,MT的引入有效激活了机体免疫系统,促进淋巴细胞增殖,实现免疫化疗的可能。二、突破三阴乳腺癌的临床治疗缺陷,本文首次设计合成了酮基布洛芬-Pt（Ⅳ）分子Ketoplatin,其对MDA-MB-231（TNBC）细胞具有非常好的选择性和超强的细胞毒活性。该药物通过在胞内大量蓄积并还原释放出铂药母核和配体ketoprofen,一方面诱导严重的DNA损伤和S期阻滞,促进细胞凋亡;另一方面遏制COX-2表达,下调vimentin和N-cadherin,逆转EMT进程,有效抑制肿瘤细胞转移侵袭。此外,在荷瘤小鼠体内Ketoplatin发挥高效低毒的抗癌功效。三、炎性微环境是保护和维持肿瘤发展和复发转移的基础,环氧合酶-2（COX-2）作为促炎因子与肿瘤炎性微环境密切相关,且在多数肿瘤组织中高表达。基于此,本文对课题组开发的3个非甾体抗炎药-Pt（Ⅳ）分子进行了相关活性机制研究。其中Etoplatin在MCF-7细胞中抑制效果最佳,通过抑制COX-2改善肿瘤微环境的炎性情况,抑制vimentin和MMP-2,上调E-cadherin逆转EMT机制,降低肿瘤细胞的转移侵袭,并在荷瘤小鼠体内发挥高效低毒的抗癌效果。结论:本文针对不同乳腺癌分子分型及炎性微环境设计合成了一系列的Pt（Ⅳ）分子,改变了顺铂原始作用模式,在靶细胞内发挥了出色的细胞毒作用,有效纠正致癌基因表达,诱导严重的DNA损伤、周期阻滞和细胞凋亡,调节肿瘤炎性微环境,抑制癌细胞的侵袭转移,克服肿瘤耐药,激活机体免疫,并于荷瘤小鼠体内发挥高效低毒的抗癌作用。该结果将为后期实现Pt（Ⅳ）前药分子的临床应用提供重要的理论依据。
车璐[4]（2020）在《蒲公英甾醇对溃疡性结肠炎的保护作用及其机制》文中研究指明研究背景溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）是炎症性肠病的一种,它是一类与免疫相关且病因未明的肠道炎性疾病,目前认为溃疡性结肠炎的发病与环境、遗传、感染与肠道菌群、免疫等因素相关。关于治疗溃疡性结肠炎的药物有多种类型,例如氨基水杨酸制剂、糖皮质激素、免疫抑制剂和生物制剂等。但是这些药物易产生抗药性、药物副作用或价格昂贵,基于其药物副作用小和治疗方法简单等优点,近年来药用植物及其衍生物在治疗UC中的使用越来越受到科学家的关注。植物甾醇是在植物中发现的天然化合物,主要存在于所有植物性食物中富含脂质和富含纤维的组分中。植物甾醇在结构上类似于胆固醇,有与胆固醇相似的结构和生物学功能,对多种疾病,如心脏血管疾病、肝脏疾病和癌症等,具有保护作用。同时植物甾醇对胃肠道炎症也有保护作用。蒲公英甾醇（taraxasterol,TS）是植物甾醇的一种,在蒲公英根中含量较高。目前研究表明,TS具有抗炎活性性,对多种炎性因子,如白介素-1（Interleukin-1,IL-1）、白介素-6（Interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子-ɑ（Tumor necrosis factor–alpha,TNF-ɑ）等的表达水平有显着的抑制作用。此外,TS对类风湿关节炎、急性肺损伤和内毒素血症等疾病有保护作用。但是,目前尚且没有关于蒲公英甾醇对于溃疡性结肠炎作用的研究。基于TS与机体炎症的密切关系,我们通过建造小鼠溃疡性结肠炎模型,研究TS对小鼠溃疡性结肠炎的保护作用,并通过脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导肠巨噬细胞研究TS的抗炎机制。第一部分蒲公英甾醇对小鼠溃疡性结肠炎模型的保护作用目的通过建造小鼠溃疡性结肠炎模型,研究蒲公英甾醇对小鼠溃疡性结肠炎的保护作用。方法实验动物为SPF级昆明小鼠,共60只,体重为18±2g,雌雄各半,小鼠采购自北京维通利华实验动物技术有限公司。60只小鼠随机分成6组,分别为空白对照组、模型组、TS低剂量组、TS中剂量组、TS高剂量组和阳性对照组。适应性喂养7天后,除空白对照组小鼠外,其余各组均采用硫酸葡聚糖钠（dextran sodium sulp,DSS）干预为溃疡性结肠炎模型。在模型建立的同时,TS低剂量组、TS中剂量组和TS高剂量组的小鼠每天分别腹腔注射剂量为2.5mg/kg、5mg/kg和10mg/kg的蒲公英甾醇。模型组小鼠每天腹腔注射40ml/kg的生理盐水。阳性对照组小鼠每天腹腔注射剂量为500mg/kg的柳氮磺吡啶（sulfasalazine,SASP）。干预9天后,禁食禁水12h后处死小鼠。处死小鼠前采用内眦取血的方法取小鼠眼球血。采用ELISA试剂盒检测各组小鼠血清中的白介素-1β（interleukin 1β,IL-1β）、白介素-6、白介素-10（interleukin 10,IL-10）和肿瘤坏死因子-ɑ的含量。处死小鼠后,取出结肠,测量结肠长度并记录,HE染色制作结肠病理切片,电子显微镜观察结肠病理损伤,双盲法对结肠进行病理学评分。分别采用羟胺法检测结肠匀浆中的超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,SOD）活力、比色法检测结肠匀浆中的谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力和髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）活力、TBA法检测结肠匀浆中的丙二醛（malondialdehyde,,MDA）含量。TUNEL法检测结肠上皮细胞凋亡情况,western blot方法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax蛋白在小鼠结肠中的表达水平。结果1.小鼠体重变化:在DSS和TS干预过程中,1至9天内,空白对照组和阳性对照组的小鼠平均体重逐渐上升,模型组、TS低、中、高剂量组小鼠的平均体重逐渐下降。第5、7、9天,各组小鼠的体重差异有统计学意义（P?0.05）。第9天,与空白对照组相比,模型组、TS低、中、高剂量组小鼠的体重显着降低,与模型组相比,TS中、高剂量组和阳性对照组小鼠的体重显着升高（P?0.05）。2.疾病活动指数:1至9天内,空白对照组小鼠的疾病活动指数一直维持在小于0.5的低水平。模型组、TS低、中、高剂量组小鼠的疾病活动指数整体呈上升趋势,但是,TS高剂量组小鼠的疾病活动指数的上升趋势较缓慢。第5、7、9天,各组小鼠的疾病活动指数差异有统计学意义（P?0.05）。第9天,与空白对照组相比,模型组、TS低、中、高剂量组和阳性对照组小鼠的疾病活动指数显着升高,与模型组相比,TS高剂量组小鼠的疾病活动指数显着降低（P?0.05）。3.结肠长度:各组的结肠长度差异有统计学意义（P?0.05）。与空白对照组相比,模型组小鼠的结肠长度显着缩短,与模型组相比,TS中、高剂量组和阳性对照组小鼠的结肠长度显着延长（P?0.05）。4.结肠损伤:空白对照组上皮细胞结构完整,无炎细胞浸润。模型组隐窝破坏和隐窝变形、排列紊乱,上皮细胞残留或完全破坏,炎细胞浸润。TS各剂量组的结肠病理损伤有不同程度的恢复。阳性对照组损害程度最轻。5.结肠病理组织学评分:各组的病理组织学评分差异有统计学意义（P?0.05）。与空白对照组相比,模型组小鼠的结肠病理组织学评分显着升高,与模型组相比,TS中、高剂量组和阳性对照组小鼠的结肠病理组织学评分显着降低（P?0.05）。6.炎性指标:各组小鼠血清中的四个炎性指标IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α水平均存在显着差异（P?0.05）。与空白对照组相比,模型组的IL-1β、IL-6、TNF-α水平显着升高,IL-10水平显着降低。与模型组相比,TS高剂量组和阳性对照组的IL-6水平显着降低,TS中、高剂量组和阳性对照组的IL-10水平显着升高,TNF-α水平显着降低（P?0.05）。TS各剂量组与模型组相比IL-1β水平无显着差异（P>0.05）。7.氧化应激指标:各组小鼠结肠匀浆中三个氧化应激指标SOD、MPO和GSH-Px活力均存在显着差异（P?0.05）,MDA含量差异无统计学意义（P>0.05）。与空白对照组相比,模型组和TS各剂量组SOD、GSH-Px活力显着降低,MPO活力显着升高。与模型组相比,TS中、高剂量组和阳性对照组的SOD活力显着升高,TS各剂量组和阳性对照组的MPO活力均显着降低,TS高剂量组和阳性对照组的GSH-Px活力显着升高（P?0.05）。8.结肠上皮细胞凋亡情况:各组的小鼠结肠上皮细胞凋亡率差异有统计学意义（P?0.05）。与空白对照组相比,模型组和TS低、中剂量组凋亡率显着升高,与模型组相比,TS中、高剂量组和阳性对照组凋亡率显着降低（P?0.05）。9.凋亡相关蛋白:各组小鼠结肠中的Bax和Bcl-2蛋白相对表达水平差异有统计学意义（P?0.05）。与空白对照组相比,模型组的Bax蛋白相对表达水平显着升高,Bcl-2蛋白显着降低。与模型组相比,TS中、高剂量组和阳性对照组的Bax蛋白相对表达水平显着降低,Bcl-2蛋白相对表达水平显着升高（P?0.05）。结论TS能够显着改善溃疡性结肠炎小鼠的疾病症状和结肠病理损伤,能够减轻溃疡性结肠炎小鼠的炎症水平和氧化应激水平,能够抑制小鼠结肠上皮细胞凋亡。第二部分蒲公英甾醇的体外抗炎、抗凋亡作用及其机制研究目的在细胞实验中研究TS对小鼠肠巨噬细胞的炎性因子、凋亡情况的影响,同时研究蒲公英甾醇对核因子κB（nuclear factor-kappa B,NF-κB）、p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,p38MAPK）和c-Jun N端激酶（c-Jun N-terminal protein kinases,JNK）信号相关通路的影响,以进一步探究蒲公英甾醇对溃疡性结肠炎保护作用的机制。方法小鼠肠巨噬细胞购买于上海富衡生物科技有限公司。噻唑蓝（thiazolyl blue,MTT）检测TS对肠巨噬细胞的毒性,根据检测结果将细胞分为5组,分别是空白对照组、脂多糖组（LPS 1ug/ml）、TS低剂量组（LPS lug/ml+TS 5ug/ml）、TS中剂量组（LPS lug/ml+TS 10ug/ml）和TS高剂量组（LPS lug/ml+TS15ug/ml）。干预24小时后,ELISA试剂盒检测细胞上清液中TNF-α、IL-6和前列腺素E2（Prostaglandin E2,PGE2）的含量。流式法检测细胞凋亡和细胞周期。Western blot检测细胞凋亡相关蛋白（Bax,Bcl-2和caspase-3）和信号通路相关蛋白（NF-κB p65、磷酸化NF-κB抑制酶（p-IκBα）、p38MAPK、磷酸化p38MAPK（p-p38MAPK）、JNK、磷酸化JNK（p-JNK））。RT-PCR检测信号通路相关因子（NF-κB p65、p38MAPK和JNK）的m RNA相对表达水平。结果1.炎症因子:三个炎性指标（TNF-α、IL-6和PGE2）均存在显着性差异（P?0.05）。与空白对照组相比,模型组的TNF-α、IL-6和PGE2水平显着升高,与模型组相比,TS高剂量组的TNF-α显着降低,TS中、高剂量组的IL-6和PGE2显着降低（P?0.05）。2.细胞周期和凋亡:各组干预细胞间各阶段细胞的比例存在显着性差异（P?0.05）。与空白对照组相比,模型组细胞在G0/G1期的比例较高,在S期和M/G2期的比例较低（P?0.05）。与模型组相比,TS各剂量组细胞在G0/G1期的比例较低,在S期和M/G2期的比例较高,但是差异无统计学意义（P>0.05）。各组的凋亡率差异有统计学意义,与空白对照组相比,模型组和TS各剂量组的细胞凋亡率显着升高,与模型组相比,TS高剂量组的细胞凋亡率显着降低（P?0.05）。3.凋亡相关蛋白:三个凋亡相关蛋白（Bax、Bcl-2和Caspase-3）均存在显着性差异（P?0.05）。与空白对照组相比,模型组Bax蛋白的相对表达水平显着升高,Bcl-2和Caspase-3蛋白的相对表达水平显着降低。与模型组相比,TS中、高剂量组Bax蛋白相对表达水平显着降低,Bcl-2蛋白的相对表达水平显着升高,TS中剂量组Caspase-3蛋白的相对表达水平显着升高（P?0.05）。4.NF-κB信号:NF-κB p65蛋白、p-IκBα和NF-κB p65 m RNA均存在显着性差异（P?0.05）。与空白对照组相比,模型组的NF-κB p65蛋白、p-IκBα和NF-κB p65 m RNA均显着升高,与模型组相比,TS中、高剂量组的NF-κB p65蛋白、p-IκBα和NF-κB p65 m RNA均显着降低（P?0.05）。5.MAPK信号:各组的p38MAPK蛋白和p38MAPK m RNA的相对表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。各组p-p38MAPK蛋白的相对表达水平差异有统计学意义,与空白对照组相比,模型组和TS各剂量组p-p38MAPK蛋白的相对表达水平显着升高,与模型组相比,TS中、高剂量组p-p38MAPK蛋白的相对表达水平显着降低（P?0.05）。6.JNK信号:各组的JNK蛋白和JNK m RNA相对表达水平的差异无统计学意义（P>0.05）,p-JNK蛋白的相对表达水平差异有统计学意义,与空白对照组相比,模型组的p-JNK蛋白显着升高（P?0.05）,但是与模型组相比,TS各剂量组p-JNK蛋白的相对表达水平无显着性差异（P>0.05）。结论在LPS诱导的小鼠肠巨噬细胞中,TS能抑制炎症反应、细胞凋亡,且对NF-κB和p38MAPK信号通路有抑制作用,但对JNK信号通路无显着影响。
叶鸿博[5]（2020）在《石膏及其配伍解热作用的物质基础及机制研究》文中研究表明目的:通过复制发热动物模型、体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7、利用肠道菌群变化和血清代谢组学等研究方法,从体内、体外及蛋白水平研究石膏及其配伍对发热动物模型的解热机制进行系统的分析和评价,深入探索石膏及其配伍解热机制的具体途径及作用靶点,初步阐释石膏清热泻火,除烦止渴的传统功效,为石膏的合理应用提供依据。方法:1.石膏不同炮制品中金属元素分析,通过ICP-MS检测技术,对湖北应城产的生石膏、煅石膏中金属元素进行定性定量分析,分析生石膏和煅石膏所含金属元素的种类和含量差异;2.石膏及其配伍解热作用的药效评价:2.1分别采用脂多糖腹腔注射和酵母菌混悬液背部皮下注射建立两种发热大鼠模型,观察生石膏和煅石膏对发热模型大鼠8小时内各时间点体温的影响;2.2.通过背部皮下注射酵母菌混悬液建立发热大鼠模型,采用实验动物体组成成分测定分析仪检测动物体组成成分的比例变化;采用血气分析仪检测动物血液中血气的变化,从生理功能角度考察石膏及其配伍对发热大鼠体液组成及血气成分变化的影响;2.3采用酶联免疫法检测模型动物血清中白介素-6（IL-6）、白介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子（TNF-α）含量;血清和脑脊液中前列腺素E2（PGE2）、精氨酸加压素（AVP）、促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、环磷酸腺苷（cAMP）和钙离子(Ca2+)含量,考察石膏及其配伍对发热模型大鼠体内致热因子的影响;2.4通过小鼠热板实验、二甲苯致耳肿胀实验、醋酸扭体实验,观察石膏及其配伍的抗炎镇痛作用;3.石膏及其配伍解热作用的机制研究:3.1选取21个样品,分为7组进行代谢研究;针对石膏及其配伍在解热作用机制方面寻找其发热相关的特征性生物标记物,并对其可能的解热通路进行筛选;3.2采用蛋白免疫印迹分析方法分析石膏及其配伍对发热模型大鼠下丘脑和肝脏组织中NF-κB通路中相关蛋白的表达水平;进一步确定石膏及其配伍解热的具体途径及其作用靶点;3.3通过体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,采用脂多糖诱导细胞炎性模型,考察石膏及其配伍对炎性细胞活力、一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（iNOS）水平的影响;3.4采用蛋白免疫印迹分析方法分析石膏及其配伍对脂多糖诱导的细胞炎性模型中NF-κB信号通路相关蛋白的表达水平,从细胞水平上阐释石膏及其配伍解热的具体机制及途径;3.5应用16SrRNA菌群生物多样性分析技术,进行石膏及其配伍对发热模型大鼠肠道菌群生物多样性的分析,考察石膏及其配伍对发热模型大鼠肠道菌群的干预作用。结果:1.ICP-MS检测结果显示,生石膏与煅石膏的微量元素有一定的差异,炮制后镁、铁、钾、钠和铝元素含量有所降低,锌和钙元素增加。2.1与模型组相比,生石膏能够降低两种发热模型动物的体温,使其恢复基础体温达到解热的作用,而煅石膏和硫酸钙不能降低发热动物的体温,无解热作用;2.2与模型组相比,石膏及其配伍能够使模型动物体内总含水量比率升高（P<0.05）,细胞外液比例升高（P<0.05）,脂肪含量百分比没有明显变化;与模型组相比,石膏及其配伍能够使模型动物血气中pCO2降低（P<0.05）,血氧中氧饱和度（sO2%）和碳氧血红蛋白分数（FO2Hb%）升高（P<0.05）,电解质中Ca2+降低（P<0.05）;2.3与模型组相比,石膏及其配伍能够使血清中IL-6、IL-1β和TNF-α含量显着降低（P<0.05）;与模型组相比,脑脊液中PGE2、CRH和cAMP含量显着降低（P<0.05）,AVP和Ca2+含量显着升高（P<0.05）,血清中PGE2、CRH、cAMP、Ca2+含量显着降低（P<0.05）,AVP含量显着升高（P<0.05）;2.4与空白组相比,石膏及其配伍能够延长小鼠舔足时间（P<0.05）,减少醋酸引起小鼠的扭体次数（P<0.05）,降低耳肿胀度（P<0.05）3.1基于广泛靶向代谢组技术的代谢分析,共检测到了482个代谢物。血清代谢分析显示与发热相关的生物标志物17种,与石膏及其配解热作用相关且回调的生物标志物21。回调的代谢物中L-O-磷酸丝氨酸、L-精氨酸、D-葡醛内酯、甘氨胆酸、前列腺素E2、L-谷氨酸、18-羟基皮质（甾）酮7种差异代谢物与发热高度相关,这些差异代谢物参与的主要代谢通路和途径均与炎症介质对TRP通道的调节、NF-κB信号通路、HIF-1信号通路,mTOR信号通路有关;3.2与模型组相比,石膏及其配伍能够显着下调下丘脑组织中NF-κB和IκKβ蛋白的表达（P<0.05）,IκBα蛋白表达显着升高（P<0.05）;与模型组相比,石膏及其配伍能够显着下调肝脏组织NF-κB、IκBα和IκKβ蛋白的表达（P<0.05）;3.3石膏及其配伍对小鼠巨噬细胞RAW264.7活力没有影响,与模型组相比,石膏及其配伍能够明显降低细胞上清液中NO含量（P<0.05）;与模型组相比,石膏及其配伍能够明显降低脂多糖诱导的iNOS含量升高（P<0.05）;3.4与模型组相比,石膏及其配伍能够显着下调炎性细胞中NF-κB和IκKβ蛋白的表达（P<0.05）,IκBα蛋白表达显着升高（P<0.05）;3.5发热模型大鼠菌群组成结构、丰度与正常组大鼠相比存在显着差异,酵母菌诱导大鼠发热后肠道菌群发生了结构性变化其中Alpha-proteobacteria、Selenomonadales、Rhodospirillales、Akkermansiaceae、Burkholderiaceae、Acidaminococcaceae、Lachnospirace-aeNK4 A136group、Prevotella9、Phascolarctobacterium变化较为显着。通过给予受试药物后各个物种都有不同程度的回调,特别是石膏组、药对组和白虎汤组几乎是以上物种均有回调作用。结论:石膏及其配伍能够显着的降低发热模型大鼠体温,可能与干预NF-κB信号通路调节,维持体液组成成分的平衡,调节肠道菌群生物多样性,改善体内氨基酸代谢、脂代谢紊乱有关。
胡雪娥[6]（2019）在《左右半结肠癌基因转录谱差异及常用分子病理标志物临床意义研究》文中提出研究目的:1、探究左右半结肠癌的基因转录谱,为左右半结肠癌生物学特征差异提供分子遗传学依据。2、比较左右半结肠癌常用分子病理标志物,进一步验证左右半结肠癌基因表达差异,阐明其临床意义。研究方法:1、选取左右半结肠癌癌组织及癌旁组织各3例,共12个样本,分为左半结肠癌癌组织与右半结肠癌癌组织、左半结肠癌癌旁组织与右半结肠癌癌旁组织、左半结肠癌癌组织与左半结肠癌癌旁组织、右半结肠癌癌组织与右半结肠癌癌旁组织共4组。提取的总RNA样品,经质检和定量合格后,构建文库,进行测序,对差异表达基因进行聚类,GO功能显着性富集分析,Pathway显着性富集分析。2、回顾性分析73例左半结肠癌及67例右半结肠癌患者的临床资料,比较左右半结肠癌生物学特征的差异,通过临床常用免疫组化分子标志物验证左右半结肠癌差异基因,探讨其临床意义。研究结果:1、左右半结肠癌中存在多个基因转录差异,涉及多个信号通路,包括氧化磷酸化、柠檬酸循环、细胞因子及细胞因子受体、MAPK信号通路、PPAR信号通路、P53信号通路、APC信号通路等。与右半结肠癌癌组织相比,左半结肠癌癌组织上调表达的基因有TP53I11、MSI1、ANAPC15、BCLAF3、COX7B等,下调表达的基因有SNAPC2、MSLN、PRSS3、TGFB1、PLK3、VEGFC、VGF、BCL2A1等。2、临床资料分析结果表明,左右半结肠癌患者存在性别差异;首发临床症状差异明显,左半结肠癌患者血便、肠梗阻、大便习惯改变等症状较右半结肠癌多见,而腹痛、消瘦、贫血等症状较右半结肠癌少见（P<0.05）;左右半结肠癌患者病理类型、粘液成分、肿瘤最大径及大体形态的差异明显,其中左半结肠癌以中分化腺癌为主,右半结肠癌以中、低分化腺癌为主,粘液型比例及肿瘤最大径较左半结肠癌高,溃疡型比例较左半结肠癌低（P<0.05）;两组患者预后不良率差异明显（P<0.05）。两组患者的分期、神经侵犯、脉管内癌栓、病史长度等方面的比较无统计学意义（P>0.05）。常用分子病理标志物中,左右半结肠癌中MLH1、MSH2、P53等免疫组化分子标志物阳性表达差异明显（P<0.05）,而COX-2、VEGF、Her-2、EGFR、Ki-67等免疫组化分子标志物阳性表达无统计学意义（P>0.05）,同时两组患者均伴有COX-2、EGFR高表达现象。结论:1、左右半结肠癌的基因转录谱存在显着差异,是左右半结肠癌生物学特征差异的分子遗传学基础,为进一步探讨左右半结肠癌的发病机制,实现个体化靶向治疗奠定了实验基础和提供了理论依据。2、左右半结肠癌患者在性别、临床症状、病理类型等方面存在差异,均高表达COX-2、EGFR,左半结肠癌患者MLH1、MSH2、P53表达水平显着高于右半结肠癌患者,这些常用分子病理标志物对指导临床结直肠癌精准个体化治疗具有重要意义。
周张孜[7]（2018）在《COX-2在脂肪肉瘤中的表达与预后的相关性研究》文中研究指明目的:通过采用免疫组化方法测定不同病理类型的脂肪肉瘤组织及癌旁组织中COX-2蛋白的表达,并结合脂肪肉瘤患者临床与预后情况,联合探讨COX-2在脂肪肉瘤表达情况与临床分期、病理分化、预后等方面的意义。方法:选取湖南省肿瘤医院2012-2013年经手术治疗的62例脂肪肉瘤疾病患者,调取病历资料和组织标本,同时选取脂肪肉瘤组织、癌旁无瘤组织,进行COX-2免疫组化染色,结合患者的临床资料（年龄、肿瘤部位、大小、病理类型、临床分期、复发情况、3年、5年生存率）,所得数据应用SPSS 22.0、GraphPad Prism7.0统计软件进行数据分析。结果:免疫组化结果显示COX-2在脂肪肉瘤组织表达强度明显高于癌旁无瘤组织,且与脂肪肉瘤患者临床分期、复发情况及死亡风险呈正相关,与病理分化程度及生存率呈负相关。结论:通过本课题研究,证实了COX-2与脂肪肉瘤的发生发展、侵袭、复发及预后可能相关,对脂肪肉瘤患者具有诊断、预防及判定预后的价值,有望成为一种具有临床实用意义的肿瘤标志物。
李雪,南琼[8]（2017）在《脱氧胆酸在大肠癌形成过程中的作用》文中认为胆汁酸中的脱氧胆酸是一种肿瘤刺激因子,在大肠癌的发展过程中起着重要的作用。大肠癌的形成是一个多阶段的过程,脱氧胆酸可以通过多种机制诱导大肠癌的发生,同时可以通过合理的饮食降低脱氧胆酸的浓度以预防大肠癌的发生。大肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一,在西方国家其发病率居恶性肿瘤的第23位。近年来,随着人们生活水平的提高和生活方式的改变,大肠癌的发病率也日益增加,在我国其发
张程程[9]（2017）在《多不饱和脂肪酸影响结肠癌发生发展的生物学作用机制研究》文中研究表明结肠癌（colorectalcancer,CRC）是常见的消化道恶性肿瘤。在我国,随着生活方式和饮食结构的改变,结肠癌的发病率也呈现逐年上升的趋势。高脂肪、高蛋白和低膳食纤维的饮食习惯是结肠癌发病的危险因素,饮食干预法是预防结肠癌发生的有效方法,研究发现饮食中降低饱和脂肪的摄入提高多不饱和脂肪酸（Polyunsaturated fatty acids,PUFAs）的比例,可以起到降低肿瘤发病的作用。因此,PUFAs对结肠癌的作用机制值得深入探讨。本研究一方面从体外细胞实验角度探讨PUFAs对结肠癌细胞LoVo和RKO的生长抑制、线粒体损伤、脂肪酸代谢等方面的影响;另一方面从体内动物实验角度出发,通过研究膳食长链不饱和脂肪酸对小鼠肠道生理环境的改善研究其对结肠癌的预防作用。体外部分以人结肠癌细胞LoVo和RKO作为研究对象,构建了 PUFAs对两细胞的体外损伤模型,结果表明本实验用到的六种脂肪酸亚油酸（Linoleic acid,LA）、亚麻酸（Alpha-linolenic acid,ALA）、花生四烯酸（Arachidonic acid,AA）、二十碳五烯酸（Eicosapentaenoic acid,EPA）、二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA）、γ-亚麻酸（γ-linolenic acud,GLA）浓度大于 120 μM均能显着抑制 LoVo和RKO细胞的生长,诱导两细胞凋亡,但对正常细胞HUVEC影响较小,且半分化细胞RKO对PUFAs的敏感性较未分化细胞LoVo大。根据MTT结果,为了保证脂肪酸处理作用合理高效,我们选择ALA（150μM）、EPA（150μM）、DHA（150μM）、LA（150μM）、GLA（300μM）、AA（150μM）、5-FU（100μM）处理 LoVo细胞,以 ALA（140μM）、EPA（120μM）、DHA（120 μM）、LA（120μM）、GLA（200μM）、AA（120μM）、5-FU（0.4μM）处理RKO,建立PUFAs损伤结肠癌细胞体外模型。以此浓度进一步研究PUFAs对结肠癌细胞LoVo和RKO的线粒体损伤、脂肪酸代谢等方面的影响,发现存在如下效果:（1）从线粒体损伤的角度探讨PUFAs对结肠癌细胞的抑制机制。结果表明,n-3（ALA、EPA、DHA）和 n-6（LA、GLA、AA）脂肪酸作用可致 LoVo 和 RKO细胞内活性氧ROS水平和细胞浆内Ca2+水平上升,ATP含量下降,导致Bcl-2家族中Bax/Bcl-2基因表达比上调。进而引起线粒体膜出现小气孔,线粒体膜电位下降,细胞色素C和AIF等蛋白释放到胞质中,最终激活Caspase-9和Caspase-3活性,引发Caspase级联反应导致细胞凋亡。多不饱和脂肪酸对结肠癌细胞线粒体有一定的损伤作用,通过线粒体凋亡途径诱导其走向死亡。（2）研究PUFAs在LoVo和RKO细胞内的生物转化及其代谢产物对两细胞的影响。油红O染色实验表明外源性添加的PUFAs通过细胞膜以脂滴形式储存于细胞质内。通过气相色谱法分析PUFAs作用下结肠癌细胞内的脂肪酸组成,发现PUFAs作用后改变了 LoVo和RKO细胞内的脂肪酸组成,提高不饱和脂肪酸比例,且在两细胞内n-3和n-6 PUFAs之间的转化存在紧密联系。此外,多不饱和脂肪酸可通过抑制结肠癌细胞COX-2、mPGES、PGDS和ALOX5的表达,进而降低脂肪酸代谢产物促炎因子PGE2和LTB4的分泌,促进抗炎因子LXA4的分泌,使癌细胞趋于不利于其生长的抗炎状态。体内部分以C57BL/6小鼠为对象,通过分析富含长链脂肪酸的鱼油、亚麻籽油、葵花籽油对小鼠结肠菌群结构,小鼠肠道主要代谢产物短链脂肪酸、胆汁酸,小鼠结肠组织脂类代谢参数的影响,分析多不饱和脂肪酸在改善肠道生理环境,预防结肠癌发生方面的功效。结果表明膳食长链脂肪酸可激活脂肪酸转运相关基因（PPARα、OSTα）mRNA的表达促进脂肪代谢,鱼油和亚麻籽油能提高结肠组织中n-3/n-6的比值,保护结肠组织免受氧化应激损伤。此外,膳食长链不饱和脂肪酸能改变小鼠肠道菌群结构,鱼油和亚麻籽油处理组在Eubacterium,Novosphingobium,和Hymenobacter上的丰度高于对照组。富含n-6 PUFAs的葵花籽油组的结肠微生物多样性不如富含n-3 PUFAs鱼油组和亚麻籽油组。亚麻籽油、葵花籽油,特别是鱼油中的多不饱和脂肪酸可促进丁酸产生菌Eubacterium的生长,提高短链脂肪酸含量（特别是丁酸含量提高50%）,降低肠道pH值,减少次级胆汁酸含量,起到改善肠道环境的作用,对结肠癌的发生有一定的预防作用。
张捷,张超峰,龚庆豪,查小应,王小军,朱松明[10]（2016）在《DCA对FXR的作用及结肠癌细胞生物学行为的影响》文中研究指明目的研究脱氧胆酸（DCA）对法尼酯衍生物X受体（FXR）的作用及其对结肠癌细胞生物学行为的影响。方法分别采用噻唑兰比色分析（MTT）法和蛋白质印迹法（Western Blot）检测不同浓度DCA对人结肠癌上皮细胞（Caco-2）增值率和FXR、尾侧型同源转录因子2（Cdx2）及黏蛋白2信使RNA（MUC2m RNA）表达水平的影响,并分析其对结肠癌细胞生物学行为的影响。结果DCA浓度10 umol/L时在6 h、12 h、24 h、48 h及72 h不同时间点Caco-2细胞抑制率均显着低于其他浓度组,差异有统计学意义（P<0.05）。同浓度下72 h时Caco-2细胞抑制率显着高于其他各时间点,差异有统计学意义（P<0.05）。72 h时10 umol/L组FXR为（2.02±0.33）%,显着低于其他浓度组,Cdx2及MUC2表达水平分别（3.97±0.67）%及（3.76±0.48）%,均显着高于其他浓度组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 DCA能促进Caco-2细胞增殖,DCA影响结肠癌患者细胞增殖率可能是通过影响FXR及其对Cdx2等因子表达水平来实现的。
二、胆汁酸对结肠癌细胞环氧合酶2表达及前列腺素E2合成作用的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、胆汁酸对结肠癌细胞环氧合酶2表达及前列腺素E2合成作用的研究（论文提纲范文）
（1）基于代谢组学的刺五加叶治疗缺血性脑卒中作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 第1章 引言 |
| 1.1 缺血性脑卒中 |
| 1.1.1 缺血性脑卒中概述 |
| 1.1.2 缺血性脑卒中发病机制及主要病理环节 |
| 1.1.3 缺血性脑卒中与肠道菌群的关系 |
| 1.1.4 缺血性脑卒中常用药物 |
| 1.2 刺五加叶主要化学成分及药理作用 |
| 1.2.1 刺五加叶概述 |
| 1.2.2 刺五加叶主要化学成分 |
| 1.2.3 刺五加叶主要药理作用 |
| 1.3 代谢组学 |
| 1.3.1 代谢组学概述 |
| 1.3.2 代谢组学研究方法 |
| 1.3.3 脂质组学研究方法 |
| 1.3.4 代谢组学在缺血性脑卒中研究中的应用 |
| 1.3.5 基于高效同位素标记衍生化的代谢组学研究 |
| 1.4 本论文的研究思路、研究目的及意义 |
| 1.4.1 研究思路 |
| 1.4.2 研究目的及意义 |
| 第2章 刺五加叶治疗缺血性脑卒中的血清脂质组学及其神经保护作用研究 |
| 2.1 实验部分 |
| 2.1.1 药品、试剂及仪器 |
| 2.1.2 刺五加叶主要活性组分的制备及成分分析 |
| 2.1.3 缺血性脑卒中大鼠模型建立 |
| 2.1.4 样品采集及处理 |
| 2.1.5 组织病理学检查 |
| 2.1.6 血清脂质代谢轮廓采集 |
| 2.1.7 数据分析 |
| 2.1.8 基于UPLC-TQ/MS的神经递质定量分析 |
| 2.1.9 基于UPLC-TQ/MS的神经递质定量分析方法学考察 |
| 2.2 结果与讨论 |
| 2.2.1 刺五加叶主要活性组分成分分析 |
| 2.2.2 组织病理学检查 |
| 2.2.3 血清脂质组学代谢轮廓分析 |
| 2.2.4 血清脂质组学潜在的生物标记物鉴定 |
| 2.2.5 血清脂质组学通路分析 |
| 2.2.6 神经递质定量研究 |
| 2.2.7 炎症因子和氧化应激水平研究 |
| 2.3 小结 |
| 第3 章 刺五加叶治疗缺血性脑卒中粪便代谢组学研究及其对微生物-肠-脑轴的影响 |
| 3.1 实验部分 |
| 3.1.1 药品、试剂及仪器 |
| 3.1.2 缺血性脑卒中大鼠模型建立 |
| 3.1.3 样品采集及处理 |
| 3.1.4 粪便代谢轮廓采集 |
| 3.1.5 数据分析 |
| 3.1.6 基于UPLC-TQ/MS的大鼠粪便胆汁酸定量分析 |
| 3.1.7 粪便菌群的16S r RNA测序 |
| 3.2 结果与讨论 |
| 3.2.1 粪便非靶向代谢组学代谢轮廓分析 |
| 3.2.2 粪便非靶向代谢组学潜在的生物标记物鉴定 |
| 3.2.3 粪便非靶向代谢组学通路分析 |
| 3.2.4 基于靶向代谢组学的大鼠粪便胆汁酸的定量研究 |
| 3.2.5 刺五加叶对大鼠粪便菌群组成的影响 |
| 3.3 小结 |
| 第4章 刺五加叶通过对益生菌的调节作用治疗缺血性脑卒中的机制验证 |
| 4.1 实验部分 |
| 4.1.1 药品、试剂及仪器 |
| 4.1.2 菌群培养及菌液制备 |
| 4.1.3 缺血性脑卒中大鼠模型建立 |
| 4.1.4 样品采集及处理 |
| 4.1.5 粪便菌群的16S r RNA测序 |
| 4.1.6 大鼠脑组织中神经递质的含量测定 |
| 4.1.7 炎症因子及氧化应激等生化指标检测 |
| 4.2 结果与讨论 |
| 4.2.1 益生菌对缺血性脑卒中大鼠粪便菌群组成的影响 |
| 4.2.2 益生菌对缺血性脑卒中大鼠脑组织中神经递质水平的影响 |
| 4.2.3 益生菌对缺血性脑卒中大鼠脑组织及血清炎症因子和氧化应激水平的影响 |
| 4.3 小结 |
| 第5章 刺五加叶治疗缺血性脑卒中的尿液代谢组学研究 |
| 5.1 实验部分 |
| 5.1.1 药品、试剂及仪器 |
| 5.1.2 缺血性脑卒中大鼠模型建立 |
| 5.1.3 样品采集及处理 |
| 5.1.4 尿液代谢轮廓采集 |
| 5.1.5 数据分析 |
| 5.1.6 ELISA法对通路分析进行验证 |
| 5.2 结果与讨论 |
| 5.2.1 尿液非靶向代谢组学代谢轮廓分析 |
| 5.2.2 尿液非靶向代谢组学潜在的生物标记物鉴定 |
| 5.2.3 尿液非靶向代谢组学通路分析 |
| 5.2.4 刺五加叶治疗缺血性脑卒中对体内代谢通路的影响验证 |
| 5.3 小结 |
| 第6章 基于高效同位素标记衍生化的刺五加叶治疗缺血性脑卒中尿液代谢组学研究 |
| 6.1 实验部分 |
| 6.1.1 药品、试剂及仪器 |
| 6.1.2 缺血性脑卒中大鼠模型建立 |
| 6.1.3 样品采集及处理 |
| 6.1.4 尿液样本同位素标记衍生化 |
| 6.1.5 尿液代谢轮廓采集 |
| 6.1.6 数据分析 |
| 6.2 结果与讨论 |
| 6.2.1 尿液高效同位素标记衍生化代谢组学代谢轮廓分析 |
| 6.2.2 尿液高效同位素标记衍生化代谢组学潜在的生物标记物鉴定 |
| 6.2.3 尿液高效同位素标记衍生化代谢组学结果的科学解释 |
| 6.3 小结 |
| 第7章 结论 |
| 本论文创新点 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（2）基于多组学的中蜂蜂蜜对氧化应激相关炎症反应的影响机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语对照表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 蜂蜜的研究进展 |
| 1.1.1 蜂蜜的分类 |
| 1.1.2 蜂蜜的成分 |
| 1.1.3 蜂蜜对氧化应激相关炎症反应的影响 |
| 1.1.4 蜂蜜的其他生物活性 |
| 1.2 多组学技术的研究进展 |
| 1.2.1 基因组学和转录组学 |
| 1.2.2 蛋白质组学 |
| 1.2.3 代谢组学 |
| 1.2.4 多组学技术在氧化应激相关炎症反应中的应用 |
| 1.3 展望 |
| 1.4 研究内容及意义 |
| 第二章 中蜂蜂蜜的营养组成及体外抗氧化活性分析 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 材料与试剂 |
| 2.2.2 理化性质测定方法 |
| 2.2.3 电感耦合等离子体质谱分析 |
| 2.2.4 高效液相色谱和质谱分析 |
| 2.2.5 体外抗氧化活性分析 |
| 2.2.6 数据分析 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 中蜂蜂蜜的理化性质及化学组成 |
| 2.3.2 中蜂蜂蜜的体外抗氧化活性 |
| 2.3.3 中蜂蜂蜜对H_2O_2诱导的DNA氧化损伤的保护作用 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 基于代谢组学的中蜂蜂蜜对大鼠血清抗氧化能力及代谢表型的影响研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 材料与试剂 |
| 3.2.2 动物实验设计 |
| 3.2.3 大鼠血清抗氧化能力分析 |
| 3.2.4 高分辨质谱分析 |
| 3.2.5 数据分析 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 中蜂蜂蜜提高大鼠血清抗氧化能力 |
| 3.3.2 摄入中蜂蜂蜜后的血清生物标志物筛选 |
| 3.3.3 摄入中蜂蜂蜜后的血清生物标志物变化 |
| 3.3.4 血清抗氧化能力和生物标志物的相关性分析 |
| 3.3.5 摄入中蜂蜂蜜后的血清代谢通路变化 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 中蜂蜂蜜对小鼠酒精性肝损伤的保护作用研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 材料与试剂 |
| 4.2.2 动物实验设计 |
| 4.2.3 生化指标分析 |
| 4.2.4 组织病理学分析 |
| 4.2.5 数据分析 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 中蜂蜂蜜提高小鼠血清抗氧化能力 |
| 4.3.2 中蜂蜂蜜保护酒精诱导的小鼠急性肝损伤 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 基于肠道微生物组学的中蜂蜂蜜对大鼠溃疡性结肠炎的影响研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 材料与试剂 |
| 5.2.2 动物实验设计 |
| 5.2.3 生化指标分析 |
| 5.2.4 组织病理学分析 |
| 5.2.5 实时荧光定量PCR分析 |
| 5.2.6 16S rRNA高通量测序分析 |
| 5.2.7 数据分析 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 中蜂蜂蜜减轻溃疡性结肠炎大鼠疾病活动指数 |
| 5.3.2 中蜂蜂蜜减少溃疡性结肠炎大鼠炎症反应 |
| 5.3.3 中蜂蜂蜜调节溃疡性结肠炎大鼠肠氧化应激稳态 |
| 5.3.4 中蜂蜂蜜调节溃疡性结肠炎大鼠肠道菌群 |
| 5.4 小结 |
| 第六章 基于多组学的中蜂蜂蜜对小鼠代谢紊乱的影响研究 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 材料与方法 |
| 6.2.1 材料与试剂 |
| 6.2.2 动物实验设计 |
| 6.2.3 生化指标分析 |
| 6.2.4 蛋白质免疫印迹分析 |
| 6.2.5 实时荧光定量PCR分析 |
| 6.2.6 肝脏转录组学分析 |
| 6.2.7 肝脏脂肪酸代谢组学分析 |
| 6.2.8 16S rRNA高通量测序分析 |
| 6.2.9 肠道菌群短链脂肪酸代谢组学分析 |
| 6.2.10 数据分析 |
| 6.3 结果与讨论 |
| 6.3.1 中蜂蜂蜜降低正常小鼠的代谢紊乱风险 |
| 6.3.2 中蜂蜂蜜改善代谢紊乱小鼠氧化应激相关炎症反应 |
| 6.3.3 中蜂蜂蜜重塑代谢紊乱小鼠肠道微生物菌群及其代谢物 |
| 6.4 小结 |
| 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 攻读博士期间取得的科研成果 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（3）基于乳腺癌分型和炎性微环境设计的Pt（Ⅳ）前药分子的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、基于雌激素受体阳性乳腺癌的褪黑素类Pt(Ⅳ)前药分子Melatplatin的设计合成及其体内外活性机制研究 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 实验原料、试剂及仪器 |
| 1.1.2 实验原理、方法 |
| 1.2 结果与讨论 |
| 1.2.1 HPLC检测系列Melatplatin化合物纯度 |
| 1.2.2 Melatplatin化合物对ER阳性细胞的选择性杀伤作用 |
| 1.2.3 Melatplatin化合物3 有效抑制ER阳性肿瘤细胞中ER?表达 |
| 1.2.4 Melatplatin化合物3与MT受体具有更高的亲和力 |
| 1.2.5 Melatplatin化合物3在MCF-7 细胞中大量蓄积 |
| 1.2.6 Melatplatin化合物的还原性能 |
| 1.2.7 Melatplatin化合物3 导致严重的DNA损伤和细胞周期阻滞 |
| 1.2.8 Melatplatin化合物3 诱导大量肿瘤细胞凋亡 |
| 1.2.9 Melatplatin化合物3 在体内发挥高效低毒的抗癌功效 |
| 1.2.10 Melatplatin化合物3 激活机体脾脏组织的免疫反应 |
| 1.3 小结 |
| 二、基于三阴乳腺癌的酮基布洛芬类Pt(Ⅳ)前药分子Ketoplatin的设计合成及其体内外活性机制研究 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.1.1 实验原料、试剂及仪器 |
| 2.1.2 实验原理、方法 |
| 2.2 结果与讨论 |
| 2.2.1 Ketoplatin 的在胞内释放 ketoprofen 和 cisplatin |
| 2.2.2 Ketoplatin在 MDA-MB-231 细胞展现优异的细胞毒性与协同作用 |
| 2.2.3 Ketoplatin在 MDA-MB-231 细胞内大量蓄积并形成Pt-DNA加合物 |
| 2.2.4 Ketoplatin有效抑制MDA-MB-231 细胞的侵袭转移能力 |
| 2.2.5 Ketoplatin引起严重的DNA损伤 |
| 2.2.6 Ketoplatin导致MDA-MB-231 细胞严重的S期阻滞 |
| 2.2.7 Ketoplatin诱导MDA-MB-231 细胞的大量凋亡 |
| 2.2.8 Ketoplatin在荷瘤小鼠体内发挥高效低毒的抗癌作用 |
| 2.3 小结 |
| 三、具有调节肿瘤炎性微环境的非甾体抗炎药类Pt(Ⅳ)前药分子NSAID-Pt(Ⅳ)的体内外活性机制研究 |
| 3.1 对象和方法 |
| 3.1.1 实验原料、试剂及仪器 |
| 3.1.2 实验原理、方法 |
| 3.2 结果与讨论 |
| 3.2.1 NSAID-Pt(Ⅳ)在肿瘤细胞中发挥优异的细胞毒性与协同作用 |
| 3.2.2 NSAID-Pt(Ⅳ)有效抑制MCF-7 细胞的侵袭转移能力 |
| 3.2.3 Etoplatin抑制COX-2、vimentin、MMP-2,上调E-cadherin表达 |
| 3.2.4 Etoplatin在荷瘤小鼠体内发挥高效低毒的抗癌作用 |
| 3.3 小结 |
| 全文结论 |
| 论文创新点 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 铂(Pt):抗癌药中的传奇 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）蒲公英甾醇对溃疡性结肠炎的保护作用及其机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 第一部分 蒲公英甾醇对小鼠溃疡性结肠炎模型的保护作用 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 实验动物和分组 |
| 2.2 材料和器材 |
| 2.3 模型建立及干预 |
| 2.4 小鼠血浆样品处理及生化检测 |
| 2.5 结肠组织病理切片和组织学损伤评分 |
| 2.6 小鼠结肠中氧化应激指标检测 |
| 2.7 凋亡情况和凋亡相关蛋白的检测 |
| 2.8 统计分析方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 小鼠体重和疾病活动指数 |
| 3.2 小鼠的结肠长度和组织病理损伤 |
| 3.3 小鼠血清炎性指标变化 |
| 3.4 小鼠结肠组织中氧化应激指标变化 |
| 3.5 小鼠结肠上皮细胞凋亡情况和凋亡相关蛋白的表达 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第二部分 蒲公英甾醇的体外抗炎、抗凋亡作用及其机制研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料和器材 |
| 2.2 细胞培养 |
| 2.3 MTT检测TS的细胞毒性及细胞干预分组 |
| 2.4 炎症因子检测 |
| 2.5 流式法检测细胞凋亡和细胞周期 |
| 2.6 Western blot检测细胞凋亡和信号通路相关蛋白 |
| 2.7 RT-PCR检测信号通路相关因子m RNA水平 |
| 3 结果 |
| 3.1 MTT检测结果 |
| 3.2 各组干预细胞上清液中炎性因子表达水平 |
| 3.3 各组干预细胞中细胞周期和凋亡的变化 |
| 3.4 各组干预细胞中凋亡相关蛋白的表达水平 |
| 3.5 各组干预细胞中相关蛋白和mRNA表达水平 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 植物甾醇的生理活性及对疾病的保护作用 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 致谢 |
（5）石膏及其配伍解热作用的物质基础及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 实验研究 |
| 第一章 石膏不同炮制品中金属元素ICP-MS分析 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 实验结果 |
| 1.4 小结 |
| 第二章 石膏及其配伍解热作用的药效评价 |
| 1 石膏对LPS发热模型大鼠的解热作用/影响 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 指标测定 |
| 1.4 统计学分析 |
| 1.5 实验结果 |
| 2 石膏对酵母发热模型大鼠的解热作用/影响 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 指标测定 |
| 2.4 统计学分析 |
| 2.5 实验结果 |
| 3 石膏及其配伍对酵母发热模型大鼠体液组成的影响 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.3 指标测定 |
| 3.4 统计学分析 |
| 3.5 实验结果 |
| 4 石膏及其配伍对酵母发热模型大鼠血气的影响 |
| 4.1 实验仪器及试剂 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.3 指标测定 |
| 4.4 统计学分析 |
| 4.5 实验结果 |
| 5 石膏及其配伍对酵母发热模型大鼠血清中致热因子的影响 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.3 指标测定 |
| 5.4 统计学分析 |
| 5.5 实验结果 |
| 6 石膏及其配伍对酵母发热模型大鼠血清及脑脊液中体温调节因子和钙离子的影响 |
| 6.1 实验材料 |
| 6.2 实验方法 |
| 6.3 指标测定 |
| 6.4 统计学分析 |
| 6.5 实验结果 |
| 7 石膏及其配伍的抗炎镇痛实验 |
| 7.1 石膏及其配伍对小鼠热板实验的影响 |
| 7.2 石膏及其配伍对小鼠二甲苯耳肿胀实验的影响 |
| 7.3 石膏及其配伍对小鼠醋酸扭体实验的影响 |
| 8 小结 |
| 第三章 石膏及其配伍解热的作用机制研究 |
| 1 石膏(及其配伍)对酵母发热模型大鼠的血清代谢组学的影响 |
| 1.1 实验材料与方法 |
| 1.2 实验结果 |
| 2 石膏及其配伍对酵母发热模型大鼠下丘脑、肝脏中NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 统计学分析 |
| 2.4 实验结果 |
| 3 石膏及其配伍对LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7 细胞活力的影响 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.3 统计学分析 |
| 3.4 实验结果 |
| 4 石膏及其配伍对LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.3 统计学分析 |
| 4.4 实验结果 |
| 5 石膏(及其配伍)对酵母发热模型大鼠肠道菌群的影响 |
| 5.1 实验样品 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.3 数据处理 |
| 5.4 结果分析 |
| 6 小结 |
| 全文讨论 |
| 结论 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
（6）左右半结肠癌基因转录谱差异及常用分子病理标志物临床意义研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一章 左右半结肠癌基因转录谱分析 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 研究对象及实验方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 结论 |
| 1.6 参考文献及数据库 |
| 第二章 左右半结肠癌常用分子病理标志物临床意义 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 研究对象及方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 结论 |
| 2.6 参考文献 |
| 总结与展望 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 |
| 致谢 |
（7）COX-2在脂肪肉瘤中的表达与预后的相关性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 前言 |
| 1.1.1 脂肪肉瘤(LPS) |
| 1.1.2 环氧合酶与肿瘤干细胞(CSCs) |
| 1.1.3 COX-2与软组织肉瘤 |
| 第二章 资料与方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.2 实验试剂 |
| 2.3 免疫组化 |
| 2.4 用Image Pro Plus软件对组织中COX-2表达量和阳性细胞数进行半定量分析 |
| 2.5 统计分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 流行病学特征 |
| 3.2 COX-2蛋白表达 |
| 3.3 COX-2的表达与临床分期及预后的关系 |
| 3.4 COX-2单因素生存曲线分析 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 结果与分析 |
| 4.2 不足与展望 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（8）脱氧胆酸在大肠癌形成过程中的作用（论文提纲范文）
| 1 脱氧胆酸诱导大肠癌发生的证据 |
| 2 脱氧胆酸诱导大肠癌的发生机制 |
| 2.1 脱氧胆酸通过表皮生长因子受体 (EGFR) -丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 和Wnt/β-catenin信号通路的致癌作用 |
| 2.2 脱氧胆酸导致基因组的不稳定 |
| 2.3 脱氧胆酸对结直肠癌细胞增殖与凋亡的作用 |
| 3 饮食因素对脱氧胆酸致大肠癌作用的影响 |
| 3.1 低脂饮食 |
| 3.2 高膳食纤维摄入 |
| 3.3 高钙和维生素D的摄入 |
| 3.4 维生素B6的摄入 |
| 4 结论 |
（9）多不饱和脂肪酸影响结肠癌发生发展的生物学作用机制研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写词中文对照表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 结肠癌概述 |
| 1.1 结肠癌流行病学 |
| 1.2 结肠癌的危险因子 |
| 1.3 结肠癌的防治 |
| 2 多不饱和脂肪酸对结肠癌发生发展的影响 |
| 2.1 多不饱和脂肪酸在体内的代谢与转化 |
| 2.2 多不饱和脂肪酸的代谢产物在结肠癌中的作用 |
| 2.3 多不饱和脂肪酸抗结肠癌活性研究 |
| 3 肠道菌群对结肠癌发生发展的影响 |
| 3.1 结肠癌与肠道菌群结构研究 |
| 3.2 肠道菌群代谢产物与结肠癌发生发展的关系 |
| 3.3 多不饱和脂肪酸对肠道菌群的影响 |
| 4 本论文目的和意义 |
| 参考文献 |
| 第二章 多不饱和脂肪酸损伤结肠癌细胞体外模型的建立 |
| 1 引言 |
| 2 实验材料与仪器 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 主要试剂及配制 |
| 2.3 主要仪器设备 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 细胞培养 |
| 3.2 MTT法测定细胞存活率 |
| 3.3 细胞显微形态分析 |
| 3.4 细胞内MDA含量测定 |
| 3.5 数据统计分析 |
| 4 结果分析 |
| 4.1 多不饱和脂肪酸对细胞存活率的影响 |
| 4.2 细胞显微形态变化 |
| 4.3 多不饱和脂肪酸对细胞内MDA含量的影响 |
| 5 讨论与小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 多不饱和脂肪酸对结肠癌细胞线粒体损伤的影响 |
| 1 引言 |
| 2 实验材料与仪器 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 主要试剂 |
| 2.3 主要仪器设备 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 细胞培养 |
| 3.2 Annexin V-FITC凋亡检测 |
| 3.3 细胞内活性氧簇ROS测定 |
| 3.4 线粒体膜电位检测 |
| 3.5 细胞内Ca~(2+)含量测定 |
| 3.6 细胞内ATP含量测定 |
| 3.7 Western blot |
| 3.8 Caspase测定 |
| 3.9 Bcl2和Bax基因的RT-PCR检测 |
| 3.10 数据统计分析 |
| 4 结果分析 |
| 4.1 多不饱和脂肪酸对结肠癌细胞凋亡的影响 |
| 4.2 对细胞内ROS含量的影响 |
| 4.3 对细胞线粒体膜电位的影响 |
| 4.4 对细胞内Ca~(2+)含量的影响 |
| 4.5 对细胞内ATP生成量的影响 |
| 4.6 对细胞质内细胞色素C和AIF含量的影响 |
| 4.7 对凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9的影响 |
| 4.8 多不饱和脂肪酸对Bcl-2和Bax基因表达水平的影响 |
| 5 讨论与小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 多不饱和脂肪酸及其代谢产物对结肠癌细胞的作用 |
| 1 引言 |
| 2 实验材料与仪器 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 主要试剂及配制 |
| 2.3 主要仪器设备 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 细胞培养 |
| 3.2 油红染色分析细胞对脂肪酸的吸收量 |
| 3.3 细胞脂肪酸组成成分分析 |
| 3.4 脂肪酸代谢产物LTB4、PGE2、LXA4含量测定 |
| 3.5 COX-2、ALOX5的测定 |
| 3.6 RT-PCR检测 |
| 3.7 LTB_4、PGE_2、LXA_4对癌细胞增殖的影响 |
| 3.8 数据统计分析 |
| 4 结果分析 |
| 4.1 多不饱和脂肪酸促进结肠癌细胞内脂滴积累 |
| 4.2 多不饱和脂肪酸对癌细胞内脂肪酸组成的影响 |
| 4.3 对脂肪酸代谢产物LTB_4、PGE_2、LXA_4含量变化的影响 |
| 4.4 对COX-2和ALOX5表达的影响 |
| 4.5 对PGDS和mPGES表达的影响 |
| 4.6 LTB_4、PGE_2、LXA_4对癌细胞增殖的影响 |
| 5 讨论与小结 |
| 参考文献 |
| 第五章 多不饱和脂肪酸对小鼠肠道生理环境的影响 |
| 1 引言 |
| 2 实验材料与仪器 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 主要试剂 |
| 2.3 主要仪器设备 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 动物分组与饲养 |
| 3.2 样品收集 |
| 3.3 测定粪便pH |
| 3.4 粪便中短链脂肪酸测定 |
| 3.5 粪便中胆汁酸含量测定 |
| 3.6 DGGE分析肠道菌群 |
| 3.7 结肠组织脂肪酸组成成分分析 |
| 3.8 RT-PCR分析 |
| 3.9 数据统计分析 |
| 4 结果分析 |
| 4.1 鱼油、亚麻籽油和葵花籽油对小鼠体重、采食量和组织器官重量的影响 |
| 4.2 鱼油、亚麻籽油和葵花籽油对小鼠粪便pH的影响 |
| 4.3 小鼠粪便中短链脂肪酸的含量变化 |
| 4.4 小鼠粪便中胆汁酸的含量变化 |
| 4.5 小鼠结肠内容物中微生物的PCR-DGGE分析结果 |
| 4.6 小鼠结肠组织脂肪酸组成分析结果 |
| 4.7 小鼠结肠组织中PPARα和OSTα mRNA表达的变化 |
| 5 讨论 |
| 参考文献 |
| 第六章 结论与展望 |
| 1 主要结论 |
| 2 主要创新点 |
| 3 不足与展望 |
| 作者简介 |
| 攻读语主期间主要科研成果 |
（10）DCA对FXR的作用及结肠癌细胞生物学行为的影响（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 实验材料和试剂 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 应用流式细胞仪检测细胞凋亡率 |
| 1.4 RT-PCR检测FXR基因的表达 |
| 1.5 观察指标 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
四、胆汁酸对结肠癌细胞环氧合酶2表达及前列腺素E2合成作用的研究（论文参考文献）
- [1]基于代谢组学的刺五加叶治疗缺血性脑卒中作用机制研究[D]. 汪戎锦. 吉林大学, 2021(01)
- [2]基于多组学的中蜂蜂蜜对氧化应激相关炎症反应的影响机制研究[D]. 赵浩安. 西北大学, 2021(10)
- [3]基于乳腺癌分型和炎性微环境设计的Pt（Ⅳ）前药分子的研究[D]. 宋雪晴. 天津医科大学, 2020(06)
- [4]蒲公英甾醇对溃疡性结肠炎的保护作用及其机制[D]. 车璐. 郑州大学, 2020(02)
- [5]石膏及其配伍解热作用的物质基础及机制研究[D]. 叶鸿博. 长春中医药大学, 2020(08)
- [6]左右半结肠癌基因转录谱差异及常用分子病理标志物临床意义研究[D]. 胡雪娥. 东南大学, 2019(03)
- [7]COX-2在脂肪肉瘤中的表达与预后的相关性研究[D]. 周张孜. 南华大学, 2018(01)
- [8]脱氧胆酸在大肠癌形成过程中的作用[J]. 李雪,南琼. 重庆医学, 2017(22)
- [9]多不饱和脂肪酸影响结肠癌发生发展的生物学作用机制研究[D]. 张程程. 浙江大学, 2017(08)
- [10]DCA对FXR的作用及结肠癌细胞生物学行为的影响[J]. 张捷,张超峰,龚庆豪,查小应,王小军,朱松明. 结直肠肛门外科, 2016(02)